Preskoči na vsebino
Neuro-2a-Luc
Tkivo
Periferni živčni sistem
Bolezen
Nevroblastom
Sinonimi
Neuro2A-Luc

Dokumenti

Neuro-2a-Luc

Cell line · Številka izdelka 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

€800.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Neuro-2a-Luc je derivat mišje celične linije nevroblastoma Neuro-2a (N2a), ki izraža luciferazo. Celice Neuro-2a izvirajo iz tkiva nevroblastoma, pridobljenega iz nevralnega grebena miši, in se pogosto uporabljajo kot in vitro model za nevronsko diferenciacijo, študije nevrotoksičnosti, raziskave signalne transdukcije ter nevroonkološke preiskave. Stabilna ekspresija luciferaznega reporterja omogoča občutljivo, kvantitativno bioluminiscenčno detekcijo živih celic in celične aktivnosti, zaradi česar je Neuro-2a-Luc še posebej uporaben za longitudinalno spremljanje v eksperimentalnih sistemih in vitro in in vivo. Odvisno od zasnove reporterja je lahko ekspresija luciferaze konstitutivna ali povezana z aktivnostjo promotorja, specifičnega za posamezno pot.

Celice Neuro-2a-Luc se pogosto uporabljajo v aplikacijah, ki vključujejo sledenje rasti tumorja, presejanje zdravil z visoko zmogljivostjo, teste nevronske diferenciacije in oceno terapevtskih odzivov v realnem času. V modelih ksenotransplantatov in metastaz bioluminiscenčno slikanje na osnovi luciferaze omogoča neinvazivno spremljanje tumorja in napredovanja bolezni z visoko občutljivostjo. Sistemi, izpeljani iz Neuro-2a, se prav tako obsežno uporabljajo za preučevanje nevronske morfologije, rasti nevritov, apoptoze, oksidativnega stresa in mehanizmov, povezanih z nevrodegenerativnimi boleznimi. Modifikacija luciferaze omogoča hitro kvantitativno analizo celične proliferacije, citotoksičnosti, transkripcijske aktivnosti ali modulacije poti v odzivu na farmakološke ali genetske motnje.

Tako kot pri drugih inženirskih linijah poročevalskih celic je lahko eksperimentalna učinkovitost Neuro-2a-Luc odvisna od dejavnikov, kot so mesto integracije konstrukta luciferaze, konfiguracija promotorja, združljivost substrata in stabilnost izražanja poročevalca med zaporednimi pasažami. Za visoko specializirane eksperimentalne aplikacije so lahko potrebni dodatni podatki o karakterizaciji, vključno s podrobnostmi o varianti luciferaze, selekcijskem markerju in validacijskih testih.

Tkivo
Periferni živčni sistem
Bolezen
Nevroblastom
Sinonimi
  • Neuro2A-Luc

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Nevronske in ameboidne matične celice

04Identifikatorji

Navajanje vira
Neuro-2a-Luc (kataloška številka Cytion 305690)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirana)
Virusi
Ektromelia virus (mišje ošpice): negativen
Odpornost proti virusom
Poliovirus 1
Reversna transkriptaza
Negativni
Izdelki
Tubulin, acetilholinesteraza

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 3 x 10⁴ celic/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.