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Neuro-2a-Luc
Pañuelo de papel
Sistema nervioso periférico
Enfermedad
Neuroblastoma
Sinónimos
Neuro2A-Luc

Documentos

Neuro-2a-Luc

Cell line · Número de producto 305690

Neuro-2a-Luc is a luciferase-expressing derivative of the Neuro-2a (N2a) mouse neuroblastoma cell line. Neuro-2a cells originate from murine neural crest-...

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Personalización / Recomendaciones

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01Información general

Descripción

Neuro-2a-Luc es un derivado de la línea celular de neuroblastoma de ratón Neuro-2a (N2a) que expresa luciferasa. Las células Neuro-2a proceden de tejido de neuroblastoma derivado de la cresta neural murina y se utilizan ampliamente como modelo in vitro para la diferenciación neuronal, estudios de neurotoxicidad, investigación sobre la transducción de señales e investigaciones en neurooncología. La expresión estable de un reportero de luciferasa permite la detección bioluminiscente sensible y cuantitativa de células viables y de la actividad celular, lo que hace que Neuro-2a-Luc sea especialmente útil para el seguimiento longitudinal tanto en sistemas experimentales in vitro como in vivo. Dependiendo del diseño del reportero, la expresión de luciferasa puede ser constitutiva o estar vinculada a la actividad de un promotor específico de una vía.

Las células Neuro-2a-Luc se emplean habitualmente en aplicaciones relacionadas con el seguimiento del crecimiento tumoral, el cribado de fármacos de alto rendimiento, los ensayos de diferenciación neural y la evaluación en tiempo real de las respuestas terapéuticas. En modelos de xenoinjertos y metástasis, la imagenología por bioluminiscencia basada en luciferasa permite el seguimiento no invasivo de la carga tumoral y la progresión de la enfermedad con alta sensibilidad. Los sistemas derivados de Neuro-2a también se utilizan ampliamente para estudiar la morfología neuronal, el crecimiento de neuritas, la apoptosis, el estrés oxidativo y los mecanismos asociados a las enfermedades neurodegenerativas. La modificación con luciferasa facilita el análisis cuantitativo rápido de la proliferación celular, la citotoxicidad, la actividad transcripcional o la modulación de las vías en respuesta a perturbaciones farmacológicas o genéticas.

Al igual que con otras líneas celulares reporteras modificadas, el rendimiento experimental de Neuro-2a-Luc puede depender de factores como el sitio de integración del constructo de luciferasa, la configuración del promotor, la compatibilidad del sustrato y la estabilidad de la expresión del reportero a lo largo de pases sucesivos. Para aplicaciones experimentales altamente especializadas, pueden ser necesarios datos de caracterización adicionales, incluyendo detalles sobre la variante de luciferasa, el marcador de selección y los ensayos de validación.

Pañuelo de papel
Sistema nervioso periférico
Enfermedad
Neuroblastoma
Sinónimos
  • Neuro2A-Luc

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Tipo de célula
Células madre neuronales y ameboides

04Identificadores

Referencia
Neuro-2a-Luc (número de catálogo de Cytion 305690)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_K046

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
Luc2 (luciérnaga, optimizada por codones)
Virus
Virus de la ectromelia (viruela del ratón): negativo
Resistencia a los virus
Poliovirus 1
Transcriptasa inversa
Negativo
Productos
Tubulina, acetilcolinesterasa

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con un 10% de FBS y un 1% de NEAA
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Control de calidad y criopreservación

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos medio de crecimiento completo + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.