Премини към съдържанието
C6
Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиома
Синоними
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Документи

C6

Cell line · Номер на продукта 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия С6 поддържа глиален клетъчен тип с фибробластна морфология и произхожда от глиом на плъх от вида Вистар-Фурт. Глиомът е индуциран чрез излагане на N-нитрозометилурея, след множество цикли на редуване на култури и пасажи на животни.

Глиомната клетъчна линия С6 често се използва в невроонкологичните изследвания за създаване на животински модели, които точно имитират характеристиките на човешкия глиом, което спомага за разработването на нови терапевтични средства и стратегии. Тя е особено ефективна при 3D клетъчни култури и високопроизводителни скрининги.

Клетките С6 са генетично разнообразни, като притежават див тип ген p53, повишена експресия на гена Rb и мутантна локализация на p16/Cdkn2a/Ink4a, но липсва експресия на mRNA на p16 и p19ARF. Те също така свръхекспресират няколко гена в човешките глиоми, като PDGFβ, IGF-1, EGFR и прекурсорни протеини Erb3/Her3.

Експресията на IGF-2, FGF-9 и FGF-10 обаче е намалена, докато експресията на гена MMP-7 остава непроменена. Подобно на човешките глиоми, клетките С6 показват повишена активност на гените от пътя на Ras, която се регулира от повишената експресия на протеина активатор на гуанинтрифосфата Ras.

Клетъчната линия С6 е използвана в различни изследвания. Например, тя е използвана за изследване на способността на 2-(2,4-дихидроксифенил)тиено-1,3-тиазин-4-он (BChTT) да спира пролиферацията на раковите клетки и за проучване на механизмите, участващи в този процес.

В друго изследване цитотоксичните и антиоксидантните свойства на суперкритичния CO2 екстракт (SCE) от старовремска брада (Usnea barbata) са изследвани с помощта на C6 клетки. Интересно е, че при тези клетки е отчетено повишено ниво на активност на глицерилфосфат дехидрогеназата в отговор на глюкокортикоиди.

Тъкан
Мозък
Заболяване
Глиома
Синоними
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Класификация

Организъм
Плъх
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на фибробласти
Тип клетка
Глиални клетки
Време за удвояване
24 часа

04Идентификатори

Източник
C6 (каталожен номер 500142 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_0194

05Проява и предразположеност

Експресирани рецептори
Глюкокортикоиди
Вируси
Положителен за LCMV
Податливост към вируси
Везикуларен стоматит (Индиана), ваксина, херпес симплекс
Устойчивост към вируси
Полиовирус 3
Обратна транскриптаза
Отрицателен
Продукти
S-100 протеин, производство на глицерилфосфат дехидрогеназа в отговор на глюкокортикоиди, соматотрофин.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2 ще дадат конфулентен слой за около 4 дни
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
Неуточнено