Przejdź do treści
C6
Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak
Synonimy
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Dokumenty

C6

Cell line · Numer produktu 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa C6 utrzymuje typ komórek glejowych o morfologii fibroblastów i pochodzi z glejaka szczura Wisthar-Furth. Glejak został wywołany przez ekspozycję na N-nitrozomocznik, po wielu cyklach naprzemiennej hodowli i pasażach zwierząt.

Linia komórkowa glejaka C6 jest często wykorzystywana w badaniach neuro-onkologicznych do tworzenia modeli zwierzęcych, które ściśle naśladują cechy ludzkiego glejaka, pomagając w opracowywaniu nowych środków i strategii terapeutycznych. Jest szczególnie skuteczna w hodowli komórek 3D i badaniach przesiewowych o wysokiej wydajności.

Komórki C6 są zróżnicowane genetycznie, posiadają gen p53 typu dzikiego, zwiększoną ekspresję genu Rb i zmutowany locus p16/Cdkn2a/Ink4a, ale brak ekspresji mRNA p16 i p19ARF. W ludzkich glejakach występuje również nadekspresja kilku genów, takich jak PDGFβ, IGF-1, EGFR i białka prekursorowe Erb3/Her3.

Jednak ekspresja IGF-2, FGF-9 i FGF-10 jest zmniejszona, podczas gdy ekspresja genu MMP-7 pozostaje niezmieniona. Podobnie jak ludzkie glejaki, komórki C6 wykazują zwiększoną aktywność genów szlaku Ras, która jest regulowana przez podwyższoną ekspresję białka aktywatora trifosforanu guaniny Ras.

Linia komórkowa C6 była wykorzystywana w różnych badaniach. Na przykład wykorzystano ją do zbadania zdolności 2-(2,4-dihydroksyfenylo)tieno-1,3-tiazyn-4-onu (BChTT) do zatrzymania proliferacji komórek nowotworowych i zbadania mechanizmów zaangażowanych w ten proces.

W innym badaniu właściwości cytotoksyczne i przeciwutleniające ekstraktu CO2 w stanie nadkrytycznym (SCE) z brody starca (Usnea barbata) badano przy użyciu komórek C6. Co ciekawe, komórki te wykazują zwiększony poziom aktywności dehydrogenazy fosforanu glicerolu w odpowiedzi na glukokortykoidy.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak
Synonimy
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Komórki glejowe
Czas podwojenia
24 godziny

04Identyfikatory

Źródło
C6 (numer katalogowy Cytion 500142)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Glukokortykoid
Wirusy
Pozytywny wynik dla LCMV
Podatność na wirusy
Pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej (Indiana), krowianka, opryszczka zwykła
Odporność na wirusy
Poliowirus 3
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Białko S-100, produkcja dehydrogenazy fosforanu glicerolu w odpowiedzi na glukokortykoidy, somatotropina.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 utworzy zlewającą się warstwę w ciągu około 4 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Nieokreślony