Pāriet uz saturu
C6
Audums
Smadzenes
Slimība
Glioma
Sinonīmi
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Dokumenti

C6

Cell line · Preces numurs 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

C6 šūnu līnija saglabā glijas šūnu tipu ar fibroblastu morfoloģiju un ir iegūta no Wisthar-Furth žurkas gliomas. Gliomu izraisīja N-nitrozometilurīnvielas iedarbība pēc vairākiem cikliem, kad pārmaiņus tika audzētas kultūras un dzīvnieki tika pārvietoti.

C6 gliomas šūnu līniju bieži izmanto neiroonkoloģiskajos pētījumos, lai izveidotu dzīvnieku modeļus, kas precīzi atdarina cilvēka gliomas īpašības, palīdzot izstrādāt jaunus terapeitiskos līdzekļus un stratēģijas. Tā ir īpaši efektīva 3D šūnu kultūrā un augstas veiktspējas skrīningā.

C6 šūnas ir ģenētiski daudzveidīgas, tām piemīt savvaļas tipa p53 gēns, paaugstināta Rb gēna ekspresija un mutants p16/Cdkn2a/Ink4a lokuss, bet trūkst p16 un p19ARF mRNS ekspresijas. Tie arī pārmērīgi ekspresē vairākus cilvēka gliomām raksturīgus gēnus, piemēram, PDGFβ, IGF-1, EGFR un Erb3/Her3 prekursoru proteīnus.

Tomēr IGF-2, FGF-9 un FGF-10 ekspresija ir samazināta, bet MMP-7 gēnu ekspresija paliek nemainīga. Tāpat kā cilvēka gliomām, arī C6 šūnām ir paaugstināta Ras ceļa gēnu aktivitāte, ko regulē paaugstināta Ras gvanīna trifosfāta aktivatora proteīna ekspresija.

C6 šūnu līnija ir izmantota dažādos pētījumos. Piemēram, to izmantoja, lai pārbaudītu 2-(2,4-dihidroksi fenil)tiēno-1,3-tiazīn-4-ona (BChTT) spēju apturēt vēža šūnu proliferāciju un izpētītu šajā procesā iesaistītos mehānismus.

Citā pētījumā, izmantojot C6 šūnas, tika pētītas vecā vīra bārdas (Usnea barbata) superkritiskā CO2 ekstrakta (SCE) citotoksiskās un antioksidatīvās īpašības. Interesanti, ka šīm šūnām, reaģējot uz glikokortikoīdiem, tika konstatēts paaugstināts glicerilfosfātdehidrogenāzes aktivitātes līmenis.

Audums
Smadzenes
Slimība
Glioma
Sinonīmi
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Gliālās šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
C6 (Cytion kataloga numurs 500142)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Glikokortikoīdi
Vīrusi
Pozitīvs uz LCMV
Jutība pret vīrusiem
Vezikulārais stomatīts (Indiana), vakcīnija, herpes simplex
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 3
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
S-100 proteīns, glicerilfosfāta dehidrogenāzes ražošana, reaģējot uz glikokortikoīdiem, somatotrofīns.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts