Mine otse sisu juurde
C6
Kude
Aju
Haigus
Glioom
Sünonüümid
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Dokumendid

C6

Cell line · Toote number 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

C6 rakuliin säilitab fibroblastide morfoloogiaga gliarakkude tüübi ja pärineb Wisthar-Furthi roti glioomist. Glioomi indutseeriti N-nitrosometüüluurea ekspositsiooniga, mis järgnes arvukatele tsüklitele vahelduvate kultuuride ja loomapassaažide järel.

C6 glioomi rakuliini kasutatakse sageli neuroonkoloogilistes uuringutes, et luua loomseid mudeleid, mis jäljendavad täpselt inimese glioomi omadusi, aidates sellega kaasa uute raviainete ja strateegiate väljatöötamisele. See on eriti tõhus 3D-rakukultuuris ja suure läbilaskevõimega sõeluuringus.

C6 rakud on geneetiliselt mitmekesised, omades metsikut tüüpi p53 geeni, suurenenud Rb geeni ekspressiooni ja mutantset p16/Cdkn2a/Ink4a lokaali, kuid neil puudub p16 ja p19ARF mRNA ekspressioon. Samuti ekspresseerivad nad üle mitmeid inimglioomide geene, nagu PDGFβ, IGF-1, EGFR ja Erb3/Her3 prekursorvalgud.

IGF-2, FGF-9 ja FGF-10 ekspressioon on aga vähenenud, samas kui MMP-7 geeni ekspressioon jääb muutumatuks. Sarnaselt inimese glioomidega on C6 rakkudes suurenenud Ras-tee geenide aktiivsus, mida reguleerib Ras'i guaniinitrifosfaadi aktivaatorvalgu kõrgendatud ekspressioon.

C6 rakuliini on kasutatud erinevates uuringutes. Näiteks uuriti selle abil 2-(2,4-dihüdroksüfenüül)tieno-1,3-tiasiin-4-ooni (BChTT) võimet peatada vähirakkude proliferatsioon ja uurida selles protsessis osalevaid mehhanisme.

Teises uuringus uuriti C6-rakkude abil vanaparta (Usnea barbata) ülekriitilise CO2 ekstrakti (SCE) tsütotoksilisi ja antioksüdantseid omadusi. Huvitaval kombel on teatatud, et need rakud näitavad glükokortikoidide toimel glütserüülfosfaatdehüdrogenaasi aktiivsuse tõusu.

Kude
Aju
Haigus
Glioom
Sünonüümid
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Glial rakud
Kahekordistumisaeg
24 tundi

04Tunnused

Viide
C6 (Cytioni katalooginumber 500142)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Glükokortikoidid
Viirused
Positiivne LCMV suhtes
Viirusele vastuvõtlikkus
Vesikulaarstomatiit (Indiana), vaktsiin, herpes simplex
Viirusresistentsus
Polioviirus 3
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
S-100 valk, glütserüülfosfaatdehüdrogenaasi tootmine vastusena glükokortikoididele, somatotropiin.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1 x 104 rakku/cm2 moodustab umbes 4 päeva jooksul konfluentse kihi.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Täpsustamata