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C6
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Glioma
Sinónimos
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

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C6

Cell line · Número de producto 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

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01Información general

Descripción

La línea celular C6 mantiene el tipo de célula glial con morfología de fibroblasto y se origina a partir de un glioma de una rata Wisthar-Furth. El glioma fue inducido por exposición a N-nitrosometilurea, tras numerosos ciclos de cultivo y pases de animales alternados.

La línea celular de glioma C6 se utiliza con frecuencia en la investigación neurooncológica para crear modelos animales que imitan fielmente las características del glioma humano, lo que contribuye al desarrollo de nuevos agentes y estrategias terapéuticos. Es especialmente eficaz en cultivos celulares tridimensionales y cribado de alto rendimiento.

Las células C6 son genéticamente diversas, ya que poseen un gen p53 de tipo salvaje, una mayor expresión del gen Rb y un locus mutante p16/Cdkn2a/Ink4a, pero carecen de expresión de ARNm de p16 y p19ARF. También sobreexpresan varios genes en los gliomas humanos, como PDGFβ, IGF-1, EGFR y proteínas precursoras Erb3/Her3.

Sin embargo, la expresión de IGF-2, FGF-9 y FGF-10 está reducida, mientras que la expresión del gen MMP-7 permanece inalterada. Al igual que los gliomas humanos, las células C6 muestran una mayor actividad de los genes de la vía Ras, que está regulada por la elevada expresión de la proteína activadora del trifosfato de guanina Ras.

La línea celular C6 se ha utilizado en diversos estudios. Por ejemplo, se utilizó para examinar la capacidad de la 2-(2,4-dihidroxi fenil)tieno-1,3-tiazin-4-ona (BChTT) para detener la proliferación de células cancerosas y para investigar los mecanismos implicados en este proceso.

En otra investigación, se estudiaron las propiedades citotóxicas y antioxidantes del extracto de CO2 supercrítico (SCE) de barba de viejo (Usnea barbata) utilizando células C6. Curiosamente, se ha informado de que estas células muestran un aumento de los niveles de actividad de la gliceril fosfato deshidrogenasa en respuesta a los glucocorticoides.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Glioma
Sinónimos
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Clasificación

Organismo
Rata
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Células gliales
Tiempo de duplicación
24 horas

04Identificadores

Referencia
C6 (número de catálogo 500142 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Glucocorticoides
Virus
Positivo para LCMV
Susceptibilidad a los virus
Estomatitis vesicular (Indiana), vaccinia, herpes simplex
Resistencia a los virus
Poliovirus 3
Transcriptasa inversa
Negativo
Productos
Proteína S-100, producción de gliceril fosfato deshidrogenasa en respuesta a los glucocorticoides, somatotropina.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 producirán una capa confluente en aproximadamente 4 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Sin especificar