Siirry sisältöön
C6
Kudos
Aivot
Sairaus
Gliooma
Synonyymit
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Asiakirjat

C6

Cell line · Tuotenumero 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

C6-solulinja ylläpitää gliasolutyyppiä, jolla on fibroblastimorfologia, ja se on peräisin Wisthar-Furthin rotan glioomasta. Gliooma indusoitiin altistumalla N-nitrosometyyliurealle useiden vuorottelevien viljely- ja eläinkierrosjaksojen jälkeen.

C6-gliooma-solulinjaa käytetään usein neuro-onkologisessa tutkimuksessa sellaisten eläinmallien luomiseksi, jotka jäljittelevät läheisesti ihmisen gliooman ominaisuuksia, mikä auttaa uusien terapeuttisten aineiden ja strategioiden kehittämisessä. Se on erityisen tehokas 3D-soluviljelyssä ja korkean läpimenon seulonnassa.

C6-solut ovat geneettisesti monimuotoisia, sillä niillä on villityyppinen p53-geeni, lisääntynyt Rb-geenin ilmentyminen ja mutantti p16/Cdkn2a/Ink4a-lokus, mutta niiltä puuttuu p16- ja p19ARF-mRNA-ilmentyminen. Ne myös yliekspressoivat useita ihmisen glioomissa esiintyviä geenejä, kuten PDGFβ:tä, IGF-1:tä, EGFR:ää ja Erb3/Her3-prekursoriproteiineja.

IGF-2:n, FGF-9:n ja FGF-10:n ilmentyminen kuitenkin vähenee, kun taas MMP-7-geenin ilmentyminen pysyy ennallaan. Ihmisen glioomien tapaan C6-soluissa Ras-reitin geenien aktiivisuus on lisääntynyt, ja sitä säätelee Ras-guaniinitrifosfaattiaktivaattoriproteiinin lisääntynyt ilmentyminen.

C6-solulinjaa on hyödynnetty useissa tutkimuksissa. Sitä käytettiin esimerkiksi tutkimaan 2-(2,4-dihydroksifenyyli)tieno-1,3-tiatsin-4-onin (BChTT) kykyä pysäyttää syöpäsolujen lisääntyminen ja tutkimaan tähän prosessiin liittyviä mekanismeja.

Toisessa tutkimuksessa tutkittiin vanhan miehenparran (Usnea barbata) ylikriittisen CO2-uutteen (SCE) sytotoksisia ja antioksidanttisia ominaisuuksia C6-soluja käyttäen. Mielenkiintoista on, että näiden solujen on raportoitu osoittavan lisääntynyttä glyseryylifosfaattidehydrogenaasiaktiivisuutta vastauksena glukokortikoidien vaikutukseen.

Kudos
Aivot
Sairaus
Gliooma
Synonyymit
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Gliasolut
Kaksinkertaistumisaika
24 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
C6 (Cytionin luettelonumero 500142)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Glukokortikoidi
Virukset
Positiivinen LCMV:lle
Viruksille altistuminen
Vesicular stomatitis (Indiana), rokotus, herpes simplex
Virusten kestävyys
Poliovirus 3
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
S-100-proteiini, glyseryylifosfaattidehydrogenaasin tuotanto vasteena glukokortikoidille, somatotropiinille.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2 tuottaa konfluenttisen kerroksen noin 4 päivässä.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Määrittelemätön