Tartalomra ugrás
C6
Szövet
Agy
Betegség
Glioma
Szinonimák
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Dokumentumok

C6

Cell line · Termékszám 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

A C6 sejtvonal fenntartja a fibroblaszt morfológiájú gliasejttípust, és egy Wisthar-Furth patkány gliómájából származik. A gliómát N-nitrozometil-karbamid expozícióval idézték elő, számos, egymást váltó tenyésztési és állatkísérleti ciklust követően.

A C6 glióma sejtvonalat gyakran használják a neuroonkológiai kutatásokban, hogy olyan állatmodelleket hozzanak létre, amelyek jól utánozzák a humán glióma jellemzőit, segítve ezzel az új terápiás szerek és stratégiák kifejlesztését. Különösen hatékony a 3D-s sejttenyésztésben és a nagy áteresztőképességű szűrésben.

A C6 sejtek genetikailag sokfélék, rendelkeznek vad típusú p53 génnel, fokozott Rb génexpresszióval és mutáns p16/Cdkn2a/Ink4a lokusszal, de hiányzik a p16 és p19ARF mRNS expressziója. A humán gliomákban több gént is túlreprezentálnak, például a PDGFβ, IGF-1, EGFR és Erb3/Her3 prekurzor fehérjéket.

Az IGF-2, FGF-9 és FGF-10 expressziója azonban csökken, míg az MMP-7 génexpressziója változatlan marad. A humán gliómákhoz hasonlóan a C6-sejtek is a Ras-útvonal génjeinek fokozott aktivitását mutatják, amelyet a Ras guanin-trifoszfát aktivátor fehérje emelkedett expressziója szabályoz.

A C6-sejtvonalat különböző vizsgálatokban használták fel. Például azt vizsgálták, hogy a 2-(2,4-dihidroxi fenil)tién-1,3-tiazin-4-on (BChTT) képes-e megállítani a rákos sejtek proliferációját, és hogy milyen mechanizmusok játszanak szerepet ebben a folyamatban.

Egy másik kutatásban C6-sejtek felhasználásával vizsgálták az öreg szakáll (Usnea barbata) szuperkritikus CO2-kivonatának (SCE) citotoxikus és antioxidáns tulajdonságait. Érdekes módon ezek a sejtek a glükokortikoidok hatására megnövekedett glicerilfoszfát-dehidrogenáz aktivitást mutattak.

Szövet
Agy
Betegség
Glioma
Szinonimák
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblaszt-szerű
Sejttípus
Gliasejtek
Kettőzési idő
24 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
C6 (Cytion katalógusszám: 500142)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Glükokortikoid
Vírusok
Pozitív LCMV-re
Vírusérzékenység
Hólyagos szájgyulladás (Indiana), vakcina, herpes simplex
Vírusrezisztencia
Poliovírus 3
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
S-100 fehérje, glicerin-foszfát-dehidrogenáz termelés glükokortikoidokra, szomatotropinra adott válaszként.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Meghatározatlan