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C6
Cell line · Product number 500142
The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...
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01General information
- Description
C6 細胞系具有成纖維細胞的形態，但維持著膠質細胞的特性，源自一隻 Wisthar-Furth 大鼠的膠質瘤。該膠質瘤是透過暴露於 N-亞硝基甲基脲，並經過多次培養與動物傳代交替循環後所誘導而成的。
C6 膠質瘤細胞系常被用於神經腫瘤學研究，用以建立能密切模擬人類膠質瘤特徵的動物模型，從而協助開發新的治療藥物與策略。該細胞系在 3D 細胞培養及高通量篩選方面尤為有效。
C6 細胞在遺傳上具有多樣性，擁有野生型 p53 基因、增高的 Rb 基因表達，以及突變的 p16/Cdkn2a/Ink4a 基因座，但缺乏 p16 和 p19ARF 的 mRNA 表達。 此外，該細胞系還過度表達人類膠質瘤中的數種基因，例如 PDGFβ、IGF-1、EGFR 以及 Erb3/Her3 前體蛋白。
然而，IGF-2、FGF-9 和 FGF-10 的表達量有所降低，而 MMP-7 基因的表達則保持不變。與人類膠質瘤相似，C6 細胞顯示出 Ras 通路基因的活性增加，此現象受 Ras 鳥苷三磷酸活化蛋白表達量升高所調控。
C6細胞系已被應用於各項研究中。例如，曾利用該細胞系檢測2-(2,4-二羥基苯基)噻吩-1,3-噻嗪-4-酮（BChTT）抑制癌細胞增殖的能力，並探究此過程涉及的機制。
在另一項研究中，研究人員利用 C6 細胞，探討了老人的鬍鬚（Usnea barbata）超臨界二氧化碳萃取物（SCE）的細胞毒性與抗氧化特性。值得注意的是，已有文獻指出，這些細胞在接觸糖皮質激素時，其甘油磷酸脫氫酶活性會有所增加。
- Tissue
- 大腦
- Disease
- 膠質瘤
- Synonyms
- C-6
- C 6
- RGC-6
- RGC6
- RGc6
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞樣
- Cell type
- 膠質細胞
- Doubling time
- 24小時
04Identifiers
- Citation
- C6（Cytion 型號 500142）
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0194
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- 糖皮質激素
- Viruses
- LCMV 檢測結果呈陽性
- Virus susceptibility
- 水疱性口炎（印第安納型）、牛痘、單純疱疹
- Virus resistance
- 小兒麻痺病毒 3 型
- Reverse transcriptase
- 否
- Products
- S-100 蛋白、對糖皮質激素的反應所產生的甘油磷酸脫氫酶、生長激素。
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640，含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺，含 2.0 g/L NaHCO₃（Cytion 產品編號 820700a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清（FBS）
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Seeding density
- 1 × 10⁴ 個細胞/cm² 約需 4 天即可形成密合的細胞層
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Post-thaw recovery
- 解凍後，將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中，並讓細胞從冷凍過程中恢復，並附著至少 24 小時。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 未指定
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用，不得用於臨床或診斷用途，亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes