Prejsť na obsah
C6
Tkanivo
Mozog
Choroba
Glióm
Synonymá
C-6, C 6, RGC-6, RGC6, RGc6

Dokumenty

C6

Cell line · Číslo výrobku 500142

The C6 cell line maintains glial cell type with fibroblast morphology and originates from a glioma of a Wisthar-Furth rat. The glioma was induced by expos...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia C6 zachováva typ gliových buniek s morfológiou fibroblastov a pochádza z gliómu potkana Wisthar-Furth. Glióm bol vyvolaný pôsobením N-nitrózometilmočoviny po mnohých cykloch striedania kultúr a pasáží na zvieratách.

Bunková línia gliómu C6 sa často využíva v neuroonkologickom výskume na vytvorenie zvieracích modelov, ktoré presne napodobňujú vlastnosti ľudského gliómu, čo pomáha pri vývoji nových terapeutických látok a stratégií. Je obzvlášť účinná pri 3D bunkových kultúrach a vysoko výkonnom skríningu.

Bunky C6 sú geneticky rôznorodé, majú divoký typ génu p53, zvýšenú expresiu génu Rb a mutovaný lokus p16/Cdkn2a/Ink4a, ale chýba im expresia mRNA p16 a p19ARF. V ľudských gliómoch tiež nadmerne exprimujú niekoľko génov, ako sú PDGFβ, IGF-1, EGFR a prekurzorové proteíny Erb3/Her3.

Expresia IGF-2, FGF-9 a FGF-10 je však znížená, zatiaľ čo expresia génu MMP-7 zostáva nezmenená. Podobne ako ľudské gliómy, aj bunky C6 vykazujú zvýšenú aktivitu génov Ras dráhy, ktorá je regulovaná zvýšenou expresiou proteínu Ras guaníntrifosfát aktivátora.

Bunková línia C6 bola použitá v rôznych štúdiách. Použila sa napríklad na skúmanie schopnosti 2-(2,4-dihydroxyfenyl)tieno-1,3-tiazin-4-ónu (BChTT) zastaviť proliferáciu rakovinových buniek a na skúmanie mechanizmov zapojených do tohto procesu.

V ďalšom výskume sa skúmali cytotoxické a antioxidačné vlastnosti superkritického extraktu CO2 (SCE) z bradavice starčekovitej (Usnea barbata) s použitím buniek C6. Zaujímavé je, že tieto bunky vykazovali zvýšenú aktivitu glycerylfosfátdehydrogenázy v reakcii na glukokortikoidy.

Tkanivo
Mozog
Choroba
Glióm
Synonymá
  • C-6
  • C 6
  • RGC-6
  • RGC6
  • RGc6

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Gliové bunky
Doba zdvojnásobenia
24 hodín

04Identifikátory

Citácia
C6 (katalógové číslo Cytion 500142)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0194

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Glukokortikoidy
Vírusy
Pozitívny na LCMV
Náchylnosť na vírusy
Vesikulárna stomatitída (Indiana), vakcína, herpes simplex
Odolnosť voči vírusom
Poliovírus 3
Reverzná transkriptáza
Negatívne
Produkty
S-100 proteín, produkcia glycerylfosfátdehydrogenázy v reakcii na glukokortikoidy, somatotrofín.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 vytvorí konfluentnú vrstvu za približne 4 dni.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
Nešpecifikované