C6

A linhagem celular C6 mantém o tipo de célula glial com morfologia de fibroblasto e tem origem em um glioma de um rato Wisthar-Furth. O glioma foi induzido pela exposição à N-nitrosometilureia, após inúmeros ciclos alternados de cultura e passagens em animais.

A linhagem celular de glioma C6 é frequentemente utilizada em pesquisas de neuro-oncologia para criar modelos animais que imitem fielmente as características do glioma humano, auxiliando no desenvolvimento de novos agentes e estratégias terapêuticas. Ela é particularmente eficaz em cultura celular 3D e triagem de alto rendimento.

As células C6 são geneticamente diversas, possuindo um gene p53 do tipo selvagem, expressão aumentada do gene Rb e um locus mutante de p16/Cdkn2a/Ink4a, mas sem expressão de mRNA de p16 e p19ARF. Elas também apresentam superexpressão de vários genes presentes em gliomas humanos, como PDGFβ, IGF-1, EGFR e proteínas precursoras de Erb3/Her3.

No entanto, a expressão de IGF-2, FGF-9 e FGF-10 é reduzida, enquanto a expressão do gene MMP-7 permanece inalterada. Assim como os gliomas humanos, as células C6 apresentam aumento da atividade dos genes da via Ras, que é regulada pela expressão elevada da proteína ativadora de trifosfato de guanina Ras.

A linhagem celular C6 tem sido utilizada em vários estudos. Por exemplo, ela foi empregada para examinar a capacidade da 2-(2,4-di-hidroxifenil)tieno-1,3-tiazin-4-ona (BChTT) de interromper a proliferação de células cancerosas e para investigar os mecanismos envolvidos nesse processo.

Em outra pesquisa, as propriedades citotóxicas e antioxidantes do extrato de CO₂ supercrítico (SCE) da barba-de-velho (Usnea barbata) foram estudadas utilizando células C6. Curiosamente, foi relatado que essas células apresentam níveis aumentados de atividade da glicerilfosfato desidrogenase em resposta aos glicocorticoides.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.