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PC-12
Tissu
Glande surrénale
Maladie
Phéochromocytome
Site métastatique
Sans objet (phéochromocytome de la médullosurrénale ; la tumeur primaire est située dans la glande surrénale)
Synonymes
PC 12, PC12

Documents

PC-12

Cell line · Référence du produit 500311

Les cellules PC-12 constituent une lignée cellulaire issue d'un phéochromocytome de la médullosurrénale du rat. Ces cellules sont d'origine embryonnaire, se développent en adhésion et ressemblent à...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

Les cellules PC-12 sont une lignée cellulaire dérivée d'un phéochromocytome de la médullosurrénale de rat. Ces cellules sont d'origine embryonnaire, se développent de manière adhérente et ressemblent à un mélange de cellules neuroblastiques et éosinophiles. Les cellules PC-12 sont des cellules catécholaminergiques qui synthétisent, stockent et libèrent la norépinéphrine et la dopamine. Elles ont un diamètre d'environ 10-12 microns et sont de petites cellules de forme irrégulière. La lignée cellulaire PC12 est un modèle classique de cellule neuronale en raison de sa capacité à acquérir des caractéristiques de neurones sympathiques lorsqu'elle est soumise à un facteur de croissance nerveuse (NGF).

Les études sur la régulation de la dopamine ont montré que les cellules PC12 synthétisent, libèrent et recaptent la dopamine et ont été largement caractérisées pour la neurosécrétion et la présence de canaux ioniques et de récepteurs de neurotransmetteurs. De plus, la proportion relative des différents sous-types de canaux Ca change au cours de la différenciation. La lignée cellulaire PC12 est un modèle cellulaire neuronal établi qui est particulièrement utile pour étudier les réponses cellulaires aux facteurs de croissance des nerfs (NGF) et la façon dont elles conduisent à l'expression de protéines spécifiques de la différenciation et à la différenciation. Lorsqu'elles sont cultivées dans du NGF, les cellules PC12 se différencient en neurones ganglionnaires sympathiques sur le plan morphologique et fonctionnel. La différenciation résulte de l'induction réversible d'un phénotype neuronal par le NGF. L'enrobage de collagène s'est avéré favorable à l'obtention de caractéristiques neuronales en termes de longueur et de densité des neurites par le traitement au NGF.

Les cellules PC12 sont tumorigènes et proviennent de rats mâles de la souche de l'hôpital New England Deaconess. La lignée cellulaire PC-12 possède 40 chromosomes, 38 autosomes, plus xY. Le facteur de croissance nerveuse (NGF) est exprimé dans les cellules PC12 et l'exposition au NGF est un régulateur crucial de la différenciation cellulaire.

En conclusion, les cellules PC12 constituent un système modèle polyvalent et largement utilisé en neurobiologie en raison de leur capacité à acquérir des caractéristiques de neurones sympathiques lorsqu'elles sont exposées au facteur de croissance nerveuse (NGF). Ces cellules ont été largement caractérisées pour la neurosécrétion, les canaux ioniques et les récepteurs de neurotransmetteurs. Leur extrême polyvalence pour les tests pharmacologiques et leur utilisation en tant que modèle établi pour l'étude de la prolifération et de la différenciation des cellules neuronales en font un outil précieux pour la recherche en neurobiologie.

Tissu
Glande surrénale
Maladie
Phéochromocytome
Site métastatique
Sans objet (phéochromocytome de la médullosurrénale ; la tumeur primaire est située dans la glande surrénale)
Applications
Recherche en neurobiologie ; différenciation neuronale induite par le NGF ; physiologie de la dopamine et des catécholamines ; neurosécrétion ; canaux ioniques (calcium, sodium) ; pharmacologie des récepteurs des neurotransmetteurs ; criblage des agents neuroprotecteurs ; modèles de la maladie de Parkinson
Synonymes
  • PC 12
  • PC12

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adhérent et en suspension
Statut OGM
Sans OGM
Informations détaillées sur le statut OGM
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Polygonal
Type de cellule
Cellules de phéochromocytome (neuroendocrines/chromaffines)
Tumorigène
Oui, chez des rats de souche du New England Deaconess Hospital
Caryotype
40 chromosomes, 38 autosomes plus xY

04Identifiants

Référence
PC-12 (numéro de catalogue Cytion 500311)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Facteur de croissance nerveuse (NGF)
Produits
Catécholamines, dopamine

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
TrypLE Express (adhérent au collagène) ; pipetage et remise en suspension pour culture en suspension
Revêtement de flacons
Collagène
Repiquage
Cellules en suspension : Retirer les cellules du substrat en les pipettant avec du milieu frais. Pour obtenir des cellules individuelles, passer la suspension plusieurs fois à travers une aiguille de calibre 22 et distribuer dans de nouveaux flacons. Culture sur collagène : Pour éliminer les cellules adhérentes, utiliser le protocole standard suivant. Retirer le milieu et rincer les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (3-5 ml de PBS pour les flacons de culture cellulaire T25, 5-10ml pour les flacons de culture cellulaire T75). Ajouter TrypleExpress (1 à 2 ml par flacon de culture cellulaire T25, 2,5 ml par flacon de culture cellulaire T75), la feuille de cellules doit être complètement recouverte. Incuber à 37 degrés Celsius pendant 10 minutes. Remettre soigneusement les cellules en suspension, l'ajout de milieu est facultatif mais non nécessaire, et répartir dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 48 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons 50 % de milieu basal + 40 % de FBS + 10 % de DMSO, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui contient des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Non spécifié
Origine ethnique
Japonais