PC-12

As células PC-12 são uma linhagem celular derivada de um feocromocitoma da medula adrenal de ratos. Essas células são de origem embrionária, crescem por aderência e se assemelham a uma mistura de células neuroblásticas e eosinofílicas. As células PC-12 são células catecolaminérgicas que sintetizam, armazenam e liberam norepinefrina e dopamina. Elas têm um diâmetro de aproximadamente 10 a 12 mícrons e são células pequenas, de formato irregular. A linhagem celular PC-12 é um modelo clássico de célula neuronal devido à sua capacidade de adquirir características de neurônios simpáticos quando exposta ao fator de crescimento nervoso (NGF).

Estudos sobre a regulação da dopamina demonstraram que as células PC12 sintetizam, liberam e recapta a dopamina, tendo sido amplamente caracterizadas quanto à neurosecreção e à presença de canais iônicos e receptores de neurotransmissores. Além disso, a proporção relativa de vários subtipos de canais de cálcio (Ca) se altera durante a diferenciação. A linhagem celular PC12 é um modelo celular neuronal consolidado, particularmente útil no estudo das respostas celulares aos fatores de crescimento nervoso (NGF) e de como estes levam à expressão de proteínas específicas da diferenciação e à própria diferenciação. Quando cultivadas em presença de NGF, as células PC12 se diferenciam em neurônios de gânglios simpáticos, tanto morfologicamente quanto funcionalmente. A diferenciação resulta da indução reversível de um fenótipo neuronal pelo NGF. Demonstrou-se que o revestimento com colágeno é favorável à obtenção de características neuronais em termos de comprimento e densidade dos neuritos por meio do tratamento com NGF.

As células PC12 são tumorigênicas e foram derivadas de ratos machos da linhagem do New England Deaconess Hospital. A linhagem celular PC-12 possui 40 cromossomos, sendo 38 autossomos, além de xY. O fator de crescimento nervoso (NGF) é expresso nas células PC12, e a exposição ao NGF é um regulador crucial da diferenciação celular.

Em conclusão, as células PC12 são um sistema-modelo versátil e amplamente utilizado na neurobiologia devido à sua capacidade de adquirir características de neurônios simpáticos quando expostas ao fator de crescimento nervoso (NGF). Essas células foram amplamente caracterizadas no que diz respeito à neurosecreção, canais iônicos e receptores de neurotransmissores. Sua extrema versatilidade para testes farmacológicos e seu uso como modelo consolidado para o estudo da proliferação e diferenciação de células neuronais as tornam uma ferramenta valiosa na pesquisa em neurobiologia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.