Ga naar de inhoud
PC-12
Weefsel
Bijnier
Ziekte
Feochromocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (feochromocytoom van het bijniermerg; de primaire tumor bevindt zich in de bijnier)
Synoniemen
PC 12, PC12

Documenten

PC-12

Cell line · Productnummer 500311

PC-12-cellen zijn een cellijn die is afgeleid van een feochromocytoom uit het bijniermerg van een rat. Deze cellen zijn van embryonale oorsprong, groeien hechtend en lijken op ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

PC-12 cellen zijn een cellijn afkomstig van een feochromocytoom van het bijniermerg van de rat. Deze cellen zijn van embryonale oorsprong, groeien adherent en lijken op een mengsel van neuroblasten en eosinofiele cellen. PC-12 cellen zijn catecholaminecellen die noradrenaline en dopamine synthetiseren, opslaan en vrijgeven. Ze hebben een diameter van ongeveer 10-12 micron en zijn kleine, onregelmatig gevormde cellen. De PC12 cellijn is een klassiek neuronaal celmodel vanwege zijn vermogen om sympathische neuronkenmerken te krijgen wanneer hij wordt behandeld met zenuwgroeifactor (NGF).

Studies naar dopamineregulatie hebben aangetoond dat PC12 cellen dopamine synthetiseren, vrijgeven en heropnemen en zijn uitgebreid gekarakteriseerd voor neurosecretie en de aanwezigheid van ionenkanalen en neurotransmitterreceptoren. Bovendien verandert het relatieve aandeel van verschillende subtypes Ca-kanalen tijdens de differentiatie. De PC12 cellijn is een gevestigd neuronaal celmodel dat bijzonder nuttig is voor het bestuderen van cellulaire reacties op zenuwgroeifactoren (NGF) en hoe deze leiden tot de expressie van differentiatiespecifieke eiwitten en differentiatie. Wanneer gekweekt in NGF, differentiëren PC12 cellen in morfologische en functionele sympathische ganglionneuronen. De differentiatie is het resultaat van de omkeerbare inductie van een neuronaal fenotype door NGF. Collageencoating blijkt gunstig te zijn voor het bereiken van neuronale kenmerken in termen van lengte en dichtheid van neurieten door behandeling met NGF.

PC12-cellen zijn tumorigene cellen en zijn afkomstig van mannelijke ratten van de New England Deaconess Hospital-stam. De PC-12 cellijn heeft 40 chromosomen, 38 autosomen, plus xY. Zenuwgroeifactor (NGF) komt tot expressie in PC12 cellen en blootstelling aan NGF is een cruciale regulator van celdifferentiatie.

Concluderend zijn PC12 cellen een veelzijdig en veelgebruikt modelsysteem in de neurobiologie vanwege hun vermogen om sympathische neuronkenmerken te krijgen wanneer ze omgaan met zenuwgroeifactor (NGF). Deze cellen zijn uitgebreid gekarakteriseerd voor neurosecretie, ionenkanalen en neurotransmitterreceptoren. Hun extreme veelzijdigheid voor farmacologische testen en gebruik als een gevestigd model voor het bestuderen van de proliferatie en differentiatie van neuronale cellen maken ze tot een waardevol instrument in neurobiologisch onderzoek.

Weefsel
Bijnier
Ziekte
Feochromocytoom
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (feochromocytoom van het bijniermerg; de primaire tumor bevindt zich in de bijnier)
Toepassingen
Neurobiologisch onderzoek; door NGF geïnduceerde neuronale differentiatie; fysiologie van dopamine en catecholamines; neurosecretie; ionenkanalen (calcium, natrium); farmacologie van neurotransmitterreceptoren; screening op neuroprotectie; modellen voor de ziekte van Parkinson
Synoniemen
  • PC 12
  • PC12

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Veelhoekig
Celtype
Feochromocytoomcellen (neuro-endocriene/chromaffinecellen)
Tumorverwekkend
Ja, in New England Deaconess Hospital stam ratten
Karyotype
40 chromosomen, 38 autosomen plus xY

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
PC-12 (Cytion catalogusnummer 500311)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Zenuwgroeifactor (NGF)
Producten
Catecholaminen, dopamine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
TrypLE Express (hecht aan collageen); pipetteeroplossing voor suspensiekweek
Coating van de kolven
Collageen
Heruitplanten
Suspensiecellen: Verwijder cellen van het substraat door pipetteren met vers medium. Om losse cellen te verkrijgen, passeer de suspensie meerdere keren door een naald van 22 gauge en breng over in nieuwe kolven. Groeien op collageen: Gebruik het volgende standaardprotocol om aanhangende cellen te verwijderen. Verwijder medium en spoel de aanhangende cellen met PBS zonder calcium en magnesium (3-5 ml PBS voor T25, 5-10ml voor T75 celkweekflessen). Voeg TrypleExpress toe (1-2ml per T25, 2,5ml per T75 celkweekfles), het celblad moet volledig bedekt zijn. Incubeer gedurende 10 minuten bij 37 graden Celsius. Resuspendeer de cellen voorzichtig, de toevoeging van medium is optioneel maar niet noodzakelijk, en breng ze over in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
1 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Na ontdooien, zaai de cellen uit op 5 x 104 cellen/cm2 en laat de cellen minstens 48 uur herstellen van het invriesproces en zich hechten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Ongespecificeerd
Etnische afkomst
Japans