Gå til innholdet
PC-12
Vev
Binyrene
Sykdom
Feokromocytom
Metastaseområde
Ikke relevant (feokromocytom i binyremargen; primærsvulsten befinner seg i binyrene)
Synonymer
PC 12, PC12

Dokumenter

PC-12

Cell line · Produktnummer 500311

PC-12-celler er en cellelinje som stammer fra et feokromocytom i binyremargen hos rotter. Disse cellene er av embryonalt opphav, vokser ved vedheft og ligner ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

PC-12-celler er en cellelinje som stammer fra et feokromocytom i binyremargen hos rotter. Disse cellene er av embryonal opprinnelse, vokser adherent og ligner en blanding av nevroblastceller og eosinofile celler. PC-12-celler er katekolaminceller som syntetiserer, lagrer og frigjør noradrenalin og dopamin. De har en diameter på ca. 10-12 mikrometer og er små, uregelmessig formede celler. PC12-cellelinjen er en klassisk modell for nevronceller på grunn av dens evne til å utvikle sympatiske nevronegenskaper når den behandles med nervevekstfaktor (NGF).

Studier av dopaminregulering har vist at PC12-celler syntetiserer, frigjør og gjenopptar dopamin, og de har blitt grundig karakterisert med hensyn til nevrosekresjon og tilstedeværelsen av ionekanaler og nevrotransmitterreseptorer. Dessuten endres den relative andelen av ulike undertyper av Ca-kanaler i løpet av differensieringen. PC12-cellelinjen er en etablert modell for nevronceller som er spesielt nyttig for å studere cellulære responser på nervevekstfaktorer (NGF) og hvordan disse fører til uttrykk av differensieringsspesifikke proteiner og differensiering. Når PC12-celler dyrkes i NGF, differensieres de morfologisk og funksjonelt til sympatiske ganglionnevroner. Differensieringen er et resultat av NGFs reversible induksjon av en nevronal fenotype. Kollagenbelegg har vist seg å være gunstig for å oppnå nevronale egenskaper i form av lengde og tetthet av nevrolitter ved NGF-behandling.

PC12-celler er tumorogene og stammer fra hannrotter av New England Deaconess Hospital-stammen. PC-12-cellelinjen har 40 kromosomer, 38 autosomer, pluss xY. Nervevekstfaktor (NGF) uttrykkes i PC12-celler, og eksponering for NGF er en avgjørende regulator for celledifferensiering.

PC12-celler er et allsidig og mye brukt modellsystem innen nevrobiologi på grunn av deres evne til å utvikle sympatiske nevronfunksjoner når de utsettes for nervevekstfaktor (NGF). Disse cellene har blitt grundig karakterisert med hensyn til nevrosekresjon, ionekanaler og nevrotransmitterreseptorer. Deres ekstreme allsidighet når det gjelder farmakologisk testing og bruk som en etablert modell for å studere spredning og differensiering av nevronale celler, gjør dem til et verdifullt verktøy i nevrobiologisk forskning.

Vev
Binyrene
Sykdom
Feokromocytom
Metastaseområde
Ikke relevant (feokromocytom i binyremargen; primærsvulsten befinner seg i binyrene)
Søknader
Neurobiologisk forskning; NGF-indusert nevronaldifferensiering; dopamin- og katekolaminfysiologi; nevrosekresjon; ionekanaler (kalsium, natrium); farmakologi knyttet til nevrotransmitterreseptorer; screening for nevrobeskyttelse; modeller for Parkinsons sykdom
Synonymer
  • PC 12
  • PC12

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
GMO-status
Uten GMO
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Polygonal
Celletype
Feokromocytomceller (neuroendokrine/kromaffinceller)
Tumorinduserende
Ja, i rotter fra New England Deaconess Hospital
Karyotype
40 kromosomer, 38 autosomer pluss xY

04Identifikatorer

Kildehenvisning
PC-12 (Cytion-katalognummer 500311)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Uttrykk og mottakelighet

Reseptorer som uttrykkes
Nervevekstfaktor (NGF)
Produkter
Katekolaminer, dopamin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
TrypLE Express (binder seg til kollagen); pipetteringsmiddel for resuspensjon ved suspensjonskultur
Belegg på kolber
Kollagen
Subkultivering
Suspensjonsceller: Fjern celler fra substratet ved å pipettere med nytt medium. For å få enkeltceller, før suspensjonen flere ganger gjennom en 22 gauge nål og fordel den i nye kolber. Dyrking på kollagen: Bruk følgende standardprotokoll for å fjerne adherente celler. Fjern mediet og skyll de adherente cellene med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-cellekulturflasker). Tilsett TrypleExpress (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved 37 grader Celsius i 10 minutter. Resuspender cellene forsiktig, tilsetning av medium er valgfritt, men ikke nødvendig, og fordel dem i nye kolber som inneholder friskt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Uspesifisert
Etnisitet
Japansk