Preskoči na vsebino
PC-12
Tkivo
Nadledvična žleza
Bolezen
Feokromocitom
Mesto metastaze
Ne velja (feokromocitom nadledvične medule; primarno mesto tumorja je nadledvična žleza)
Sinonimi
PC 12, PC12

Dokumenti

PC-12

Cell line · Številka izdelka 500311

Celice PC-12 so celična linija, pridobljena iz feohromocitoma nadledvične sredice podgane. Te celice so embrionalnega izvora, rastejo adhezivno in so podobne ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice PC-12 so celična linija, pridobljena iz feokromocitoma nadledvične žleze podgane. Te celice so embrionalnega izvora, rastejo adherentno in so podobne mešanici nevroblastičnih in eozinofilnih celic. Celice PC-12 so kateholaminske celice, ki sintetizirajo, shranjujejo in sproščajo noradrenalin in dopamin. Imajo premer približno 10-12 mikronov in so majhne, nepravilno oblikovane celice. Celična linija PC12 je klasični model nevronskih celic zaradi svoje sposobnosti, da pridobi lastnosti simpatičnega nevrona, ko deluje z živčnim rastnim faktorjem (NGF).

Študije o regulaciji dopamina so pokazale, da celice PC12 sintetizirajo, sproščajo in ponovno privzemajo dopamin ter so bile obširno karakterizirane glede na nevrosekrecijo in prisotnost ionskih kanalov in nevrotransmiterskih receptorjev. Poleg tega se relativni delež različnih podtipov Ca kanalov med diferenciacijo spreminja. Celična linija PC12 je uveljavljen model nevronskih celic, ki je še posebej uporaben pri preučevanju celičnih odzivov na živčne rastne dejavnike (NGF) in kako ti vodijo do izražanja za diferenciacijo specifičnih beljakovin in diferenciacije. Pri gojenju v NGF se celice PC12 morfološko in funkcionalno diferencirajo v nevrone simpatičnih ganglijev. Diferenciacija je posledica reverzibilne indukcije nevronskega fenotipa z NGF. Pokazalo se je, da kolagenska prevleka ugodno vpliva na doseganje nevronskih značilnosti v smislu dolžine in gostote nevritov z obdelavo z NGF.

Celice PC12 so tumorogene in so bile pridobljene iz samcev podgan seva New England Deaconess Hospital. Celična linija PC-12 ima 40 kromosomov, 38 avtosomov in xY. V celicah PC12 je izražen živčni rastni faktor (NGF), izpostavljenost NGF pa je eden ključnih regulatorjev diferenciacije celic.

Skratka, celice PC12 so vsestranski in pogosto uporabljen modelni sistem v nevrobiologiji zaradi svoje sposobnosti, da ob stiku z živčnim rastnim faktorjem (NGF) pridobijo lastnosti simpatičnega nevrona. Te celice so bile obsežno karakterizirane za nevrosekrecijo, ionske kanale in nevrotransmiterske receptorje. Zaradi njihove izjemne vsestranskosti za farmakološko testiranje in uporabe kot uveljavljenega modela za preučevanje proliferacije in diferenciacije nevronskih celic so dragoceno orodje v nevrobioloških raziskavah.

Tkivo
Nadledvična žleza
Bolezen
Feokromocitom
Mesto metastaze
Ne velja (feokromocitom nadledvične medule; primarno mesto tumorja je nadledvična žleza)
Uporaba
Raziskave na področju nevrobiologije; NGF-inducirana nevronska diferenciacija; fiziologija dopamina in kateholaminov; nevrosekrecija; ionski kanali (kalcij, natrij); farmakologija receptorjev nevrotransmiterjev; presejanje nevrozaščitnih sredstev; modeli Parkinsonove bolezni
Sinonimi
  • PC 12
  • PC12

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Poligonalni
Vrsta celice
Celice feohromocitoma (nevroendokrine/kromafinske)
Tumorigeničen
Da, v bolnišnici New England Deaconess Hospital na sevu podgan
Kariotip
40 kromosomov, 38 avtosomov in xY

04Identifikatorji

Navajanje vira
PC-12 (kataloška številka Cytion 500311)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Rastni dejavnik živcev (NGF)
Izdelki
Kateholamini, dopamin

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
TrypLE Express (za adhezijo na kolagenu); sredstvo za ponovno suspenzijo s pipetiranjem za suspenzijsko kulturo
Premaz steklenice
Kolagen
Preusmeritev v drugo kulturo
Suspenzijske celice: Odstranite celice s substrata s pipetiranjem s svežim gojiščem. Če želite dobiti posamezne celice, suspenzijo večkrat precedite skozi iglo 22 in jo razpršite v nove bučke. Gojenje na kolagenu: Za odstranitev adherentnih celic uporabite naslednji standardni protokol. Odstranite gojišče in izperite adherentne celice z uporabo PBS brez kalcija in magnezija (3-5 ml PBS za bučke T25, 5-10 ml za bučke T75). Dodajte TrypleExpress (1-2 ml na bučko T25, 2,5 ml na bučko T75), celični list mora biti popolnoma prekrit. Inkubirajte pri 37 stopinjah Celzija 10 minut. Previdno ponovno suspendirajte celice, dodajanje gojišča ni obvezno, vendar ni potrebno, in jih prelijte v nove bučke s svežim gojiščem.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo za najmanj 48 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo 50 % osnovno gojišče + 40 % FBS + 10 % DMSO ali CM-1 (kataloška številka Cytion 800100), ki vsebuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, ki ga povzroča krio.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Neopredeljeno
Etnična pripadnost
Japonski