Gå direkt till innehållet
PC-12
Vävnad
Binjurebarken
Sjukdom
Feokromocytom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (feokromocytom i binjuremärgen; tumörens primära lokalisation är binjuren)
Synonymer
PC 12, PC12

PC-12

Cell line · Produktnummer 500311

PC-12-celler är en cellinje som härstammar från ett feokromocytom i binjuremärgen hos råttor. Dessa celler är av embryonalt ursprung, växer i vidhäftning och liknar ...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

PC-12-celler är en cellinje som härrör från ett feokromocytom i binjuremärgen hos råtta. Dessa celler är av embryonalt ursprung, växer samman och liknar en blandning av neuroblastiska och eosinofila celler. PC-12-celler är katekolaminceller som syntetiserar, lagrar och frisätter noradrenalin och dopamin. De har en diameter på cirka 10-12 mikrometer och är små, oregelbundet formade celler. PC12-cellinjen är en klassisk neuronal cellmodell på grund av dess förmåga att förvärva sympatiska neuronfunktioner när den hanteras med nervtillväxtfaktor (NGF).

Studier av dopaminreglering har visat att PC12-celler syntetiserar, frisätter och återupptar dopamin och har karakteriserats ingående för neurosekretion och förekomst av jonkanaler och neurotransmittorreceptorer. Dessutom förändras den relativa andelen av olika subtyper av Ca-kanaler under differentieringen. PC12-cellinjen är en etablerad neuronal cellmodell som är särskilt användbar för att studera cellulära svar på nervtillväxtfaktorer (NGF) och hur dessa leder till uttryck av differentieringsspecifika proteiner och differentiering. När PC12-celler odlas i NGF differentieras de morfologiskt och funktionellt till sympatiska ganglionneuroner. Differentieringen är ett resultat av NGF:s reversibla induktion av en neuronal fenotyp. Kollagenbeläggning har visat sig vara gynnsamt för att uppnå neuronala egenskaper i form av längd och densitet hos neuriterna genom NGF-behandling.

PC12-celler är tumörframkallande och härrör från hanråttor av New England Deaconess Hospital-stammen. PC-12 cellinjen har 40 kromosomer, 38 autosomer, plus xY. Nervtillväxtfaktor (NGF) uttrycks i PC12-celler och exponering för NGF är en viktig regulator för celldifferentiering.

Sammanfattningsvis är PC12-celler ett mångsidigt och allmänt använt modellsystem inom neurobiologi på grund av deras förmåga att förvärva sympatiska neuronfunktioner när de hanterar nervtillväxtfaktor (NGF). Dessa celler har karakteriserats utförligt med avseende på neurosekretion, jonkanaler och neurotransmittorreceptorer. Deras extrema mångsidighet för farmakologisk testning och användning som en etablerad modell för att studera proliferation och differentiering av neuronala celler gör dem till ett värdefullt verktyg inom neurobiologisk forskning.

Vävnad
Binjurebarken
Sjukdom
Feokromocytom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (feokromocytom i binjuremärgen; tumörens primära lokalisation är binjuren)
Ansökningar
Neurobiologisk forskning; NGF-inducerad neuronal differentiering; dopamin- och katekolaminfysiologi; neurosekretion; jonkanaler (kalcium, natrium); farmakologi för neurotransmittorreceptorer; screening av neuroprotektiva medel; modeller för Parkinsons sjukdom
Synonymer
  • PC 12
  • PC12

02Klassificering

Organism
Råtta
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Adhärens och suspension
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Polygonal
Celltyp
Feokromocytomceller (neuroendokrina/kromaffina)
Tumörframkallande
Ja, i New England Deaconess Hospital stamråttor
Karyotyp
40 kromosomer, 38 autosomer plus xY

04Identifierare

Källa
PC-12 (Cytion katalognummer 500311)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Nervtillväxtfaktor (NGF)
Produkter
Katekolaminer, dopamin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
RPMI 1640, med: 2,0 mM stabilt glutamin, med: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
TrypLE Express (vidhäftar på kollagen); pipettering och resuspension för suspensionsodling
Beläggning av kolvar
Kollagen
Vidareodling
Suspension av celler: Avlägsna cellerna från substratet genom att pipettera med färskt medium. För att få enskilda celler, passera suspensionen flera gånger genom en 22 gauge nål och fördela i nya kolvar. Odling på kollagen: För att avlägsna vidhäftande celler, använd följande standardprotokoll. Avlägsna medium och skölj de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (3-5 ml PBS för T25, 5-10 ml för T75 cellodlingskolvar). Tillsätt TrypleExpress (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75 cellodlingskolv), cellarket måste täckas helt. Inkubera vid 37 grader Celsius i 10 minuter. Resuspendera cellerna försiktigt, tillsats av medium är valfritt men inte nödvändigt, och fördela dem i nya kolvar som innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 48 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi 50% basalt medium + 40% FBS + 10% DMSO, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Ospecificerad
Etnicitet
Japanska