PC-12

PC-12 rakud on rakuliin, mis on saadud roti neerupealise medulla feokromotsütoomist. Need rakud on embrüonaalse päritoluga, kasvavad adherentselt ja sarnanevad neuroblastiliste ja eosinofiilsete rakkude seguga. PC-12 rakud on katehhoolamiinirakud, mis sünteesivad, ladustavad ja vabastavad noradrenaliini ja dopamiini. Nende läbimõõt on ligikaudu 10-12 mikronit ja nad on väikesed, ebakorrapärase kujuga rakud. PC12 rakuliin on klassikaline neuronaalne rakumudel, kuna see on võimeline omandama sümpaatilise neuroni omadused närvi kasvufaktoriga (NGF) tegelemisel.

Dopamiini reguleerimise uuringud on näidanud, et PC12 rakud sünteesivad, vabastavad ja võtavad dopamiini tagasi ning neid on põhjalikult iseloomustatud neurosekretsiooni ja ioonikanalite ning neurotransmitteriretseptorite olemasolu osas. Lisaks sellele muutub diferentseerumise käigus erinevate Ca-kanalite alatüüpide suhteline osakaal. PC12 rakuliin on väljakujunenud neuronaalne rakumudel, mis on eriti kasulik selleks, et uurida rakkude reaktsioone närvi kasvufaktoritele (NGF) ja seda, kuidas need viivad diferentseerumisspetsiifiliste valkude ekspressiooni ja diferentseerumiseni. Kui PC12 rakke kasvatatakse NGFis, diferentseeruvad need morfoloogiliselt ja funktsionaalselt sümpaatilise ganglioni neuroniteks. Diferentseerumine tuleneb neuronaalse fenotüübi pöörduvast indutseerimisest NGF-i poolt. On näidatud, et kollageeniga katmine soodustab neuroni omaduste saavutamist neuriitide pikkuse ja tiheduse osas NGF-ravi korral.

PC12 rakud on tumorigeensed ja need on saadud New England Deaconess Hospital'i tüve isasrottidest. PC-12 rakuliinil on 40 kromosoomi, 38 autosoomi ja xY. Närvi kasvufaktor (NGF) ekspresseerub PC12 rakkudes ja kokkupuude NGF-iga on üks oluline rakkude diferentseerumise regulaator.

Kokkuvõtteks võib öelda, et PC12 rakud on neurobioloogias mitmekülgne ja laialdaselt kasutatav mudelisüsteem tänu nende võimele omandada närvi kasvufaktoriga (NGF) tegelemisel sümpaatiliste neuronite omadusi. Neid rakke on ulatuslikult iseloomustatud neurosekretsiooni, ioonikanalite ja neurotransmitteriretseptorite osas. Nende äärmine mitmekülgsus farmakoloogilisteks testideks ja kasutamine väljakujunenud mudelina neuronaalsete rakkude proliferatsiooni ja diferentseerumise uurimiseks teeb neist väärtusliku vahendi neurobioloogilistes uuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest