PC-12

As células PC-12 são uma linha celular derivada de um feocromocitoma da medula adrenal do rato. Estas células são de origem embrionária, crescem de forma aderente e assemelham-se a uma mistura de células neuroblásticas e eosinofílicas. As células PC-12 são células catecolaminérgicas que sintetizam, armazenam e libertam norepinefrina e dopamina. Têm um diâmetro de aproximadamente 10-12 microns e são células pequenas e de forma irregular. A linha de células PC12 é um modelo clássico de célula neuronal devido à sua capacidade de adquirir caraterísticas de neurónio simpático quando se lida com o fator de crescimento nervoso (NGF).

Estudos sobre a regulação da dopamina mostraram que as células PC12 sintetizam, libertam e recaptam dopamina e foram amplamente caracterizadas quanto à neurossecreção e à presença de canais iónicos e receptores de neurotransmissores. Além disso, a proporção relativa de vários subtipos de canais de Ca altera-se durante a diferenciação. A linha celular PC12 é um modelo celular neuronal estabelecido, particularmente útil para estudar as respostas celulares aos factores de crescimento nervoso (NGF) e a forma como estes conduzem à expressão de proteínas específicas da diferenciação e à diferenciação. Quando cultivadas em NGF, as células PC12 diferenciam-se morfológica e funcionalmente em neurónios ganglionares simpáticos. A diferenciação resulta da indução reversível de um fenótipo neuronal pelo NGF. O revestimento de colagénio demonstrou ser favorável à obtenção de caraterísticas neuronais em termos de comprimento e densidade de neurites através do tratamento com NGF.

As células PC12 são tumorigénicas e foram derivadas de ratos machos da estirpe do New England Deaconess Hospital. A linha celular PC-12 tem 40 cromossomas, 38 autossomas e um xY. O fator de crescimento nervoso (NGF) é expresso nas células PC12 e a exposição ao NGF é um regulador crucial da diferenciação celular.

Em conclusão, as células PC12 são um sistema modelo versátil e amplamente utilizado em neurobiologia devido à sua capacidade de adquirir caraterísticas de neurónio simpático quando lidam com o fator de crescimento nervoso (NGF). Estas células foram extensivamente caracterizadas quanto à neurosecreção, canais iónicos e receptores de neurotransmissores. A sua extrema versatilidade para testes farmacológicos e a sua utilização como modelo estabelecido para o estudo da proliferação e diferenciação de células neuronais fazem delas uma ferramenta valiosa na investigação em neurobiologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia