PC-12

PC-12-solut ovat rotan lisämunuaisydinytimen feokromosytoomasta peräisin oleva solulinja. Nämä solut ovat alkioperäisiä, ne kasvavat kiinni ja muistuttavat neuroblastisten ja eosinofiilisten solujen sekoitusta. PC-12-solut ovat katekoliamiinisoluja, jotka syntetisoivat, varastoivat ja vapauttavat noradrenaliinia ja dopamiinia. Niiden halkaisija on noin 10-12 mikronia ja ne ovat pieniä, epäsäännöllisen muotoisia soluja. PC12-solulinja on klassinen hermosolumalli, koska se kykenee hankkimaan sympaattisen hermosolun piirteitä, kun sitä käsitellään hermokasvutekijän (NGF) kanssa.

Dopamiinin säätelyä koskevat tutkimukset ovat osoittaneet, että PC12-solut syntetisoivat, vapauttavat ja ottavat takaisin dopamiinia, ja niitä on luonnehdittu laajasti hermosekretion sekä ionikanavien ja välittäjäainereseptorien esiintymisen osalta. Lisäksi Ca-kanavien eri alatyyppien suhteellinen osuus muuttuu erilaistumisen aikana. PC12-solulinja on vakiintunut hermosolumalli, joka on erityisen hyödyllinen tutkittaessa solujen vasteita hermokasvutekijöille (NGF) ja sitä, miten nämä johtavat erilaistumispesifisten proteiinien ilmentymiseen ja erilaistumiseen. Kun PC12-soluja viljellään NGF:ssä, ne erilaistuvat morfologisesti ja toiminnallisesti sympaattisen ganglionin neuroneiksi. Erilaistuminen on seurausta NGF:n aiheuttamasta neuronaalisen fenotyypin palautuvasta induktiosta. Kollageenipinnoitteen on osoitettu olevan suotuisa neuroniominaisuuksien saavuttamiselle neuriittien pituuden ja tiheyden suhteen NGF-hoidon avulla.

PC12-solut ovat tumorigeenisiä, ja ne on saatu urospuolisista New England Deaconess Hospital -kannan rotista. PC-12-solulinjalla on 40 kromosomia, 38 autosomia sekä xY. Hermokasvutekijä (NGF) ilmentyy PC12-soluissa, ja altistuminen NGF:lle on yksi solujen erilaistumisen ratkaiseva säätelijä.

Yhteenvetona voidaan todeta, että PC12-solut ovat monipuolinen ja laajalti käytetty mallijärjestelmä neurobiologiassa, koska ne kykenevät hankkimaan sympaattisen neuronin piirteitä käsitellessään hermokasvutekijää (NGF). Näille soluille on laajalti luonnehdittu hermosekretiota, ionikanavia ja välittäjäaineiden reseptoreita. Niiden äärimmäinen monipuolisuus farmakologisissa testeissä ja käyttö vakiintuneena mallina hermosolujen proliferaation ja erilaistumisen tutkimisessa tekevät niistä arvokkaan välineen neurobiologisessa tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa