İçeriğe atla
PC-12
Doku
Adrenal bez
Hastalık
Feokromositoma
Metastaz yeri
Uygulanamaz (adrenal medulla feokromositomu; birincil tümör yeri adrenal bezdir)
Eş anlamlılar
PC 12, PC12

PC-12

Cell line · Ürün numarası 500311

PC-12 hücreleri, sıçan adrenal medullasındaki bir feokromositomdan elde edilen bir hücre dizisidir. Bu hücreler embriyonik kökenlidir, yapışarak büyürler ve ...'ye benzerler

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

PC-12 hücreleri, sıçan adrenal medullasının feokromositomasından türetilen bir hücre hattıdır. Bu hücreler embriyonik kökenlidir, yapışık olarak büyür ve nöroblastik ve eozinofilik hücrelerin bir karışımına benzer. PC-12 hücreleri norepinefrin ve dopamin sentezleyen, depolayan ve salgılayan katekolamin hücreleridir. Yaklaşık 10-12 mikron çapa sahiptirler ve küçük, düzensiz şekilli hücrelerdir. PC12 hücre hattı, sinir büyüme faktörü (NGF) ile uğraşırken sempatik nöron özellikleri kazanma kabiliyeti nedeniyle klasik bir nöronal hücre modelidir.

Dopamin düzenlemesi üzerine yapılan çalışmalar, PC12 hücrelerinin dopamin sentezlediğini, saldığını ve geri aldığını ve nörosekresyon ve iyon kanalları ve nörotransmitter reseptörlerinin varlığı açısından kapsamlı bir şekilde karakterize edildiğini göstermiştir. Dahası, Ca kanallarının çeşitli alt tiplerinin göreceli oranı farklılaşma sırasında değişir. PC12 hücre hattı, sinir büyüme faktörlerine (NGF) hücresel tepkileri ve bunların farklılaşmaya özgü proteinlerin ifadesine ve farklılaşmaya nasıl yol açtığını incelemek için özellikle yararlı olan yerleşik bir nöronal hücre modelidir. NGF'de kültürlendiğinde, PC12 hücreleri morfolojik ve işlevsel olarak sempatik ganglion nöronlarına farklılaşır. Farklılaşma, NGF tarafından nöronal bir fenotipin tersine çevrilebilir indüksiyonundan kaynaklanmaktadır. Kolajen kaplamanın, NGF tedavisi ile nöritlerin uzunluğu ve yoğunluğu açısından nöronal özelliklerin elde edilmesine elverişli olduğu gösterilmiştir.

PC12 hücreleri tümörijeniktir ve erkek New England Deaconess Hastanesi soyu sıçanlardan elde edilmiştir. PC-12 hücre hattı 40 kromozoma, 38 otozoma ve artı xY'ye sahiptir. Sinir büyüme faktörü (NGF) PC12 hücrelerinde ifade edilir ve NGF'ye maruz kalmak hücre farklılaşmasının önemli bir düzenleyicisidir.

Sonuç olarak, PC12 hücreleri, sinir büyüme faktörü (NGF) ile uğraşırken sempatik nöron özellikleri kazanma yetenekleri nedeniyle nörobiyolojide çok yönlü ve yaygın olarak kullanılan bir model sistemdir. Bu hücreler nörosekresyon, iyon kanalları ve nörotransmitter reseptörleri açısından kapsamlı bir şekilde karakterize edilmiştir. Farmakolojik testler için aşırı çok yönlülükleri ve nöronal hücrelerin çoğalmasını ve farklılaşmasını incelemek için yerleşik bir model olarak kullanılmaları, onları nörobiyoloji araştırmalarında değerli bir araç haline getirmektedir.

Doku
Adrenal bez
Hastalık
Feokromositoma
Metastaz yeri
Uygulanamaz (adrenal medulla feokromositomu; birincil tümör yeri adrenal bezdir)
Uygulamalar
Nörobiyoloji araştırmaları; NGF’nin tetiklediği nöronal farklılaşma; dopamin ve katekolamin fizyolojisi; nörosekresyon; iyon kanalları (kalsiyum, sodyum); nörotransmitter reseptör farmakolojisi; nöroproteksiyon taraması; Parkinson hastalığı modelleri
Eş anlamlılar
  • PC 12
  • PC12

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
GDO durumu
GDO'suz
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Çokgen
Hücre türü
Feokromositoma hücreleri (nöroendokrin/kromaffin)
Tümör oluşturucu
Evet, New England Deaconess Hastanesi sıçanlarında
Karyotip
40 kromozom, 38 otozom artı xY

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
PC-12 (Cytion katalog numarası 500311)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Sinir büyüme faktörü (NGF)
Ürünler
Katekolaminler, dopamin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
TrypLE Express (kollajen üzerinde yapışan); süspansiyon kültürü için pipetleme yoluyla yeniden süspansiyon
Şişe kaplaması
Kolajen
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücreleri: Taze besiyeri ile pipetleyerek hücreleri substrattan çıkarın. Tek hücreler elde etmek için süspansiyonu 22 gauge iğneden birkaç kez geçirin ve yeni şişelere dağıtın. Kolajen üzerinde büyüme: Yapışık hücreleri çıkarmak için aşağıdaki standart protokolü kullanın. Ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS kullanarak yapışık hücreleri durulayın (T25 için 3-5 ml PBS, T75 hücre kültürü şişeleri için 5-10 ml). TrypleExpress ekleyin (T25 başına 1-2 ml, T75 hücre kültürü şişesi başına 2,5 ml), hücre tabakası tamamen kaplanmalıdır. 37 santigrat derecede 10 dakika inkübe edin. Hücreleri dikkatlice yeniden süspanse edin, ortam eklenmesi isteğe bağlıdır ancak gerekli değildir ve taze ortam içeren yeni şişelere dağıtın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 48 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, iyileşmeyi artırmak ve kriyo kaynaklı stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren %50 bazal ortam + %40 FBS + %10 DMSO veya CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Belirtilmemiş
Etnik köken
Japonca