Skip to content
PC-12
Tissue
בלוטת יותרת הכליה
Disease
פאווכרומוציטומה
Metastatic site
לא רלוונטי (פאוכרומוציטומה של מדולת יותרת הכליה; המיקום הראשוני של הגידול הוא בבלוטת יותרת הכליה)
Synonyms
PC 12, PC12

Documents

PC-12

Cell line · Product number 500311

PC-12 cells are a cell line derived from a pheochromocytoma of the rat adrenal medulla. These cells are of embryonic origin, grow adherently and resemble ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי PC-12 הם קו תאים שמקורו בפיאוכרומוציטומה של מוח העצם של בלוטת יותרת הכליה של חולדה. תאים אלה הם ממוצא עוברי, צומחים באופן הדוק ודומים לתערובת של תאים נוירובלסטיים ואאוזינופיליים. תאי PC-12 הם תאי קטכולאמין המייצרים, מאחסנים ומשחררים נוראדרנלין ודופמין. קוטרם כ-10-12 מיקרון והם קטנים ובלתי סדירים בצורתם. קו התאים PC12 הוא מודל תאי עצב קלאסי בשל יכולתו לרכוש תכונות של עצב סימפתטי כאשר הוא בא במגע עם גורם גדילה עצבי (NGF).

מחקרים על ויסות דופמין הראו שתאי PC12 מסנתזים, משחררים ומספחים מחדש דופמין, והם אופיינו בהרחבה מבחינת הפרשת עצבית ונוכחות תעלות יוניות וקולטני נוירוטרנסמיטרים. יתר על כן, היחס היחסי בין תת-סוגים שונים של תעלות Ca משתנה במהלך ההבחנה. קו התאים PC12 הוא מודל תאי עצב מבוסס, שימושי במיוחד בחקר התגובות התאיות לגורמי גדילה עצביים (NGF) וכיצד אלה מובילים לביטוי של חלבונים ספציפיים להבחנה ולהבחנה. כאשר הם מתורבתים ב-NGF, תאי PC12 מבחינים בין נוירונים גנגליוניים סימפתטיים מבחינה מורפולוגית ותפקודית. ההבחנה נובעת מהשראה הפיכה של פנוטיפ עצבי על ידי NGF. ציפוי קולגן הוכח כמשפר את השגת המאפיינים העצביים מבחינת אורך וצפיפות הנויריטים על ידי טיפול ב-NGF.

תאי PC12 הם תאים סרטניים והם נגזרו מזן חולדות זכרים של בית החולים New England Deaconess. קו התאים PC-12 כולל 40 כרומוזומים, 38 אוטוזומים, בתוספת xY. גורם גדילה עצבי (NGF) בא לידי ביטוי בתאי PC12, וחשיפה ל-NGF היא אחד המווסתים החשובים של התמיינות תאים.

לסיכום, תאי PC12 הם מערכת מודל רב-תכליתית ונפוצה בנוירוביולוגיה בשל יכולתם לרכוש תכונות של נוירונים סימפתטיים כאשר הם באים במגע עם גורם גדילה עצבי (NGF). תאים אלה אופיינו בהרחבה מבחינת הפרשת נוירו-הפרשות, תעלות יוניות וקולטני נוירוטרנסמיטרים. הרב-תכליתיות הקיצונית שלהם לבדיקות פרמקולוגיות ולשימוש כמודל מבוסס לחקר התרבות וההתמיינות של תאי עצב הופכת אותם לכלי חשוב במחקר הנוירוביולוגי.

Tissue
בלוטת יותרת הכליה
Disease
פאווכרומוציטומה
Metastatic site
לא רלוונטי (פאוכרומוציטומה של מדולת יותרת הכליה; המיקום הראשוני של הגידול הוא בבלוטת יותרת הכליה)
Applications
מחקר בנוירוביולוגיה; התמיינות נוירונים המושרה על ידי NGF; פיזיולוגיה של דופמין וקטכולאמינים; נוירו-הפרשה; תעלות יונים (סידן, נתרן); פרמקולוגיה של קולטני נוירוטרנסמיטרים; סינון שיטות להגנה על תאי עצב; מודלים למחלת פרקינסון
Synonyms
  • PC 12
  • PC12

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
מצולע
Cell type
תאי פאוכרומוציטומה (נוירואנדוקריניים/כרומפיניים)
Tumourigenic
כן, בבית החולים דיקונס בניו אינגלנד, חולדות זן
Karyotype
40 כרומוזומים, 38 אוטוזומים בתוספת xY

04Identifiers

Citation
PC-12 (מספר קטלוגי Cytion 500311)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
פקטור גדילה עצבי (NGF)
Products
קטכולאמינים, דופמין

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
TrypLE Express (הנדבק לקולגן); תמיסת פיפוטציה לתרבית בתמיסה
Flask coating
קולגן
Subculturing
תאים בתמיסה: הסר את התאים מהמצע באמצעות פיפטה עם מדיום טרי. כדי להשיג תאים בודדים, העבירו את התמיסה מספר פעמים דרך מחט בקוטר 22 והעבירו אותה לצלוחיות חדשות. גידול על קולגן: כדי להסיר תאים דבוקים, השתמשו בפרוטוקול הסטנדרטי הבא. הסירו את המדיום ושטפו את התאים הדבוקים באמצעות PBS ללא סידן ומגנזיום (3-5 מ"ל PBS עבור T25, 5-10 מ"ל עבור צלוחיות תרבית תאים T75). הוסף TrypleExpress (1-2 מ"ל לכל T25, 2.5 מ"ל לכל בקבוק תרבית תאים T75), יש לכסות את יריעת התאים לחלוטין. דגיר ב-37 מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. השעה בזהירות את התאים, תוספת המדיום היא אופציונלית אך לא הכרחית, והעבר לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחו את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניחו לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 48 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים ב-50% מדיום בסיסי + 40% FBS + 10% DMSO, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקירור.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
לא צוין
Ethnicity
יפנית