Skip to content
PC-12
Tissue
ต่อมหมวกไต
Disease
เฟอโอโครโมไซโตมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของต่อมหมวกไต; ตำแหน่งเนื้องอกปฐมภูมิคือต่อมหมวกไต)
Synonyms
PC 12, PC12

Documents

PC-12

Cell line · Product number 500311

PC-12 cells are a cell line derived from a pheochromocytoma of the rat adrenal medulla. These cells are of embryonic origin, grow adherently and resemble ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ PC-12 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่สกัดจากเนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของต่อมหมวกไตส่วนเมดัลลาในหนู เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากตัวอ่อน เติบโตแบบเกาะติดกัน และมีลักษณะคล้ายการผสมระหว่างเซลล์นิวโรบลาสติกและเซลล์อีโอซิโนฟิลิกเซลล์ PC-12 เป็นเซลล์คาเทโคลามีนที่สังเคราะห์ เก็บรักษา และปล่อยนอร์อิพิเนฟรินและโดปามีน มีเส้นผ่านศูนย์กลางประมาณ 10-12 ไมโครเมตร และเป็นเซลล์ขนาดเล็ก รูปร่างไม่สม่ำเสมอ สายพันธุ์เซลล์ PC12 เป็นแบบจำลองเซลล์ประสาทคลาสสิกเนื่องจากความสามารถในการรับลักษณะของเซลล์ประสาทซิมพาเทติกเมื่อสัมผัสกับปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF)

การศึกษาเกี่ยวกับการควบคุมโดปามีนแสดงให้เห็นว่าเซลล์ PC12 สามารถสังเคราะห์ ปล่อย และดูดกลับโดปามีนได้ และได้รับการศึกษาอย่างละเอียดเกี่ยวกับการหลั่งสารทางระบบประสาท (neurosecretion) และการมีอยู่ของช่องไอออน (ion channels) และตัวรับสารสื่อประสาท (neurotransmitter receptors) นอกจากนี้ สัดส่วนสัมพัทธ์ของชนิดย่อยต่างๆ ของช่องแคลเซียม (Ca channels) ยังเปลี่ยนแปลงระหว่างการแยกตัว (differentiation) อีกด้วยเซลล์ไลน์ PC12 เป็นแบบจำลองเซลล์ประสาทที่ได้รับการยอมรับแล้ว ซึ่งมีประโยชน์อย่างยิ่งในการศึกษาการตอบสนองของเซลล์ต่อปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) และวิธีที่สิ่งเหล่านี้นำไปสู่การแสดงออกของโปรตีนเฉพาะการแยกตัวและการแยกตัว เมื่อเพาะเลี้ยงใน NGF เซลล์ PC12 จะแยกตัวเป็นเซลล์ประสาทของปมประสาทซิมพาเทติกทั้งในเชิงสัณฐานวิทยาและหน้าที่ความแตกต่างนี้เกิดจากการเหนี่ยวนำแบบย้อนกลับได้ของฟีโนไทป์ของเซลล์ประสาทโดย NGF การเคลือบด้วยคอลลาเจนได้แสดงให้เห็นว่าเป็นประโยชน์ต่อการบรรลุลักษณะของเซลล์ประสาทในแง่ของความยาวและความหนาแน่นของเส้นใยประสาทโดยการรักษาด้วย NGF

เซลล์ PC12 เป็นเซลล์ก่อเนื้องอกและได้มาจากหนูสายพันธุ์ New England Deaconess Hospital เพศผู้ สายพันธุ์เซลล์ PC-12 มีโครโมโซม 40 แท่ง ประกอบด้วยออโตโซม 38 แท่ง และ xY หนึ่งแท่ง เซลล์ PC12 ผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) และการสัมผัสกับ NGF เป็นหนึ่งในตัวควบคุมที่สำคัญของการเปลี่ยนแปลงของเซลล์

โดยสรุป เซลล์ PC12 เป็นระบบแบบจำลองที่มีความหลากหลายและถูกใช้อย่างแพร่หลายในสาขาประสาทชีววิทยา เนื่องจากความสามารถในการรับลักษณะของเซลล์ประสาทซิมพาเทติกเมื่อเผชิญกับปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) เซลล์เหล่านี้ได้รับการศึกษาอย่างละเอียดในด้านการหลั่งสารประสาท ช่องไอออน และตัวรับสารสื่อประสาท ความหลากหลายอย่างสูงในการทดสอบทางเภสัชวิทยาและการใช้เป็นแบบจำลองที่จัดตั้งขึ้นสำหรับการศึกษาการเพิ่มจำนวนและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาท ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการวิจัยทางประสาทชีววิทยา

Tissue
ต่อมหมวกไต
Disease
เฟอโอโครโมไซโตมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (เนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของต่อมหมวกไต; ตำแหน่งเนื้องอกปฐมภูมิคือต่อมหมวกไต)
Applications
การวิจัยทางประสาทชีววิทยา; การเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาทที่เกิดจาก NGF; สรีรวิทยาของโดปามีนและคาเทโคลามีน; การหลั่งสารประสาท; ช่องไอออน (แคลเซียม, โซเดียม); เภสัชวิทยาของตัวรับสารสื่อประสาท; การคัดกรองการปกป้องระบบประสาท; แบบจำลองโรคพาร์กินสัน
Synonyms
  • PC 12
  • PC12

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
หลายเหลี่ยม
Cell type
เซลล์เฟอโอโครโมไซโตมา (ระบบประสาท/โครมาฟิน)
Tumourigenic
ใช่ ในโรงพยาบาลนิวอิงแลนด์ดีคอนเนส
Karyotype
40 โครโมโซม, 38 ออโตโซมบวก xY

04Identifiers

Citation
พีซี-12 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 500311)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
ปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF)
Products
คาเทโคลามีน, โดปามีน

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
TrypLE Express (เกาะบนคอลลาเจน); การทำละลายด้วยปิเปตสำหรับการเพาะเลี้ยงแบบแขวนลอย
Flask coating
คอลลาเจน
Subculturing
เซลล์แขวนลอย: นำเซลล์ออกจากพื้นผิวโดยใช้ปิเปตดูดพร้อมกับเติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่ในการแยกเซลล์เดี่ยว ให้ผ่านสารแขวนลอยผ่านเข็มขนาด 22 เกจหลายครั้งและแบ่งใส่ลงในขวดใหม่ การเพาะเลี้ยงบนคอลลาเจน: ในการกำจัดเซลล์ที่เกาะติด ให้ใช้โปรโตคอลมาตรฐานดังต่อไปนี้ นำอาหารเลี้ยงเซลล์ออกและล้างเซลล์ที่เกาะติดโดยใช้ PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (3-5 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ขนาด T75)เติม TrypleExpress (1-2 มล. ต่อขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T25, 2.5 มล. ต่อขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) ให้ครอบคลุมแผ่นเซลล์ทั้งหมด หมักที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที คนเซลล์ให้ละลายอย่างระมัดระวัง การเติมอาหารเลี้ยงเซลล์เพิ่มเติมเป็นทางเลือกแต่ไม่จำเป็น จากนั้นแบ่งเซลล์ลงในขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์/ซม. และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 48 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้ 50% basal medium + 40% FBS + 10% DMSO หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ไม่ระบุ
Ethnicity
ญี่ปุ่น