Gå direkte til indholdet
PC-12
Væv
Binyrerne
Sygdom
Fæokromocytom
Metastasested
Ikke relevant (feokromocytom i binyremarven; tumorens primære lokalisation er binyrerne)
Synonymer
PC 12, PC12

Dokumenter

PC-12

Cell line · Varenummer 500311

PC-12-celler er en cellelinje, der stammer fra et feokromocytom i binyremarven hos rotter. Disse celler er af embryonalt oprindelse, vokser ved vedhæftning og ligner ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

PC-12-celler er en cellelinje, der stammer fra et fæokromocytom i rotternes binyremarv. Disse celler er af embryonal oprindelse, vokser adhærent og ligner en blanding af neuroblastiske og eosinofile celler. PC-12-celler er katekolaminceller, der syntetiserer, opbevarer og frigiver noradrenalin og dopamin. De har en diameter på ca. 10-12 mikrometer og er små, uregelmæssigt formede celler. PC12-cellelinjen er en klassisk neuronal cellemodel på grund af dens evne til at få sympatiske neuronfunktioner, når den behandles med nervevækstfaktor (NGF).

Undersøgelser af dopaminregulering har vist, at PC12-celler syntetiserer, frigiver og genoptager dopamin og er blevet grundigt karakteriseret for neurosekretion og tilstedeværelsen af ionkanaler og neurotransmitterreceptorer. Desuden ændres den relative andel af forskellige undertyper af Ca-kanaler under differentiering. PC12-cellelinjen er en etableret neuronal cellemodel, som er særlig nyttig til at studere cellulære reaktioner på nervevækstfaktorer (NGF), og hvordan disse fører til udtryk af differentieringsspecifikke proteiner og differentiering. Når PC12-celler dyrkes i NGF, differentieres de morfologisk og funktionelt til sympatiske ganglionneuroner. Differentieringen er resultatet af NGF's reversible induktion af en neuronal fænotype. Kollagenbelægning har vist sig at være gunstig for at opnå neuronale egenskaber i form af længde og tæthed af neuritter ved NGF-behandling.

PC12-celler er tumorigeniske og stammer fra hanrotter af New England Deaconess Hospital-stammen. PC-12-cellelinjen har 40 kromosomer, 38 autosomer plus xY. Nervevækstfaktor (NGF) udtrykkes i PC12-celler, og eksponering for NGF er en afgørende regulator for celledifferentiering.

Konklusionen er, at PC12-celler er et alsidigt og meget anvendt modelsystem i neurobiologi på grund af deres evne til at udvikle sympatiske neuronfunktioner, når de udsættes for nervevækstfaktor (NGF). Disse celler er blevet grundigt karakteriseret for neurosekretion, ionkanaler og neurotransmitterreceptorer. Deres ekstreme alsidighed til farmakologisk testning og brug som en etableret model til undersøgelse af spredning og differentiering af neuronale celler gør dem til et værdifuldt værktøj i neurobiologisk forskning.

Væv
Binyrerne
Sygdom
Fæokromocytom
Metastasested
Ikke relevant (feokromocytom i binyremarven; tumorens primære lokalisation er binyrerne)
Anvendelser
Neurobiologisk forskning; NGF-induceret neuronal differentiering; dopamin- og katekolaminfysiologi; neurosekretion; ionkanaler (calcium, natrium); farmakologi vedrørende neurotransmitterreceptorer; screening for neurobeskyttelse; modeller for Parkinsons sygdom
Synonymer
  • PC 12
  • PC12

02Klassificering

Organisme
Rotte
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
GMO-status
GMO-fri
Oplysninger om GMO-status
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Polygonal
Celletype
Feokromocytomceller (neuroendokrine/kromaffinceller)
Tumorfremkaldende
Yeees, i New England Deaconess Hospital stamme rotter
Karyotype
40 kromosomer, 38 autosomer plus xY

04Identifikatorer

Kildehenvisning
PC-12 (Cytion katalognummer 500311)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Nervevækstfaktor (NGF)
Produkter
Katekolaminer, dopamin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
TrypLE Express (adhærent på kollagen); pipetteringsopløsning til suspensionskultur
Belægning af kolber
Kollagen
Oddyrkning
Suspension af celler: Fjern celler fra substratet ved at pipettere med frisk medium. For at få enkeltceller skal du føre suspensionen flere gange gennem en 22 gauge-nål og fordele den i nye kolber. Dyrkning på kollagen: Brug følgende standardprotokol til at fjerne vedhæftede celler. Fjern mediet, og skyl de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-cellekulturflasker). Tilsæt TrypleExpress (1-2 ml pr. T25, 2,5 ml pr. T75-cellekulturkolbe), cellearket skal være helt dækket. Inkuber ved 37 grader Celsius i 10 minutter. Resuspender forsigtigt cellerne, tilsætning af medium er valgfrit, men ikke nødvendigt, og fordel dem i nye kolber, der indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende midler og metaboliske stabilisatorer for at øge gendannelsen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Uspecificeret
Etnisk tilhørsforhold
Japansk