PC-12

Les cellules PC-12 constituent une lignée cellulaire dérivée d’un phéochromocytome de la médullaire surrénale du rat. Ces cellules sont d’origine embryonnaire, se développent en adhésion et ressemblent à un mélange de cellules neuroblastiques et éosinophiles. Les cellules PC-12 sont des cellules catécholaminergiques qui synthétisent, stockent et libèrent de la norépinéphrine et de la dopamine. Elles ont un diamètre d’environ 10 à 12 microns et sont de petites cellules de forme irrégulière. La lignée cellulaire PC-12 constitue un modèle cellulaire neuronal classique en raison de sa capacité à acquérir les caractéristiques des neurones sympathiques lorsqu’elle est exposée au facteur de croissance nerveuse (NGF).

Des études sur la régulation de la dopamine ont montré que les cellules PC-12 synthétisent, libèrent et réabsorbent la dopamine; elles ont fait l’objet d’une caractérisation approfondie en ce qui concerne la neurosécrétion ainsi que la présence de canaux ioniques et de récepteurs de neurotransmetteurs. De plus, la proportion relative des différents sous-types de canaux calciques varie au cours de la différenciation. La lignée cellulaire PC12 est un modèle cellulaire neuronal bien établi, particulièrement utile pour étudier les réponses cellulaires aux facteurs de croissance nerveuse (NGF) et la manière dont celles-ci conduisent à l’expression de protéines spécifiques à la différenciation ainsi qu’à la différenciation elle-même. Lorsqu’elles sont cultivées en présence de NGF, les cellules PC12 se différencient en neurones ganglionnaires sympathiques, tant sur le plan morphologique que fonctionnel. La différenciation résulte de l’induction réversible d’un phénotype neuronal par le NGF. Il a été démontré qu’un revêtement de collagène favorise l’acquisition de caractéristiques neuronales, notamment en termes de longueur et de densité des neurites, lors d’un traitement au NGF.

Les cellules PC12 sont tumorigènes et proviennent de rats mâles de la souche du New England Deaconess Hospital. La lignée cellulaire PC-12 possède 40 chromosomes, soit 38 autosomes, plus les chromosomes X et Y. Le facteur de croissance nerveux (NGF) est exprimé dans les cellules PC-12, et l’exposition au NGF constitue un régulateur crucial de la différenciation cellulaire.

En conclusion, les cellules PC-12 constituent un système modèle polyvalent et largement utilisé en neurobiologie en raison de leur capacité à acquérir les caractéristiques des neurones sympathiques lorsqu’elles sont exposées au facteur de croissance nerveuse (NGF). Ces cellules ont fait l’objet d’une caractérisation approfondie en ce qui concerne la neurosécrétion, les canaux ioniques et les récepteurs des neurotransmetteurs. Leur extrême polyvalence pour les essais pharmacologiques et leur utilisation comme modèle établi pour l’étude de la prolifération et de la différenciation des cellules neuronales en font un outil précieux dans la recherche en neurobiologie.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.