Pāriet uz saturu
PC-12
Audums
Virsnieru dziedzeris
Slimība
Feohromocitoma
Metastāžu vieta
Neattiecas (adrenālo dziedzera medulas feohromocitoma; primārā audzēja lokalizācija ir adrenālais dziedzeris)
Sinonīmi
PC 12, PC12

Dokumenti

PC-12

Cell line · Preces numurs 500311

PC-12 šūnas ir šūnu līnija, kas iegūta no žurkas virsnieru medullas feohromocitomas. Šīs šūnas ir embrionālas izcelsmes, aug adhezīvi un līdzinās ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

PC-12 šūnas ir šūnu līnija, kas iegūta no žurkas virsnieru smadzeņu smadzeņu feohromocitomas. Šīm šūnām ir embrionāla izcelsme, tās aug adherenti un atgādina neiroblastisko un eozinofīlo šūnu maisījumu. PC-12 šūnas ir kateholamīnu šūnas, kas sintezē, uzglabā un izdala norepinefrīnu un dopamīnu. To diametrs ir aptuveni 10-12 mikroni, un tās ir mazas, neregulāras formas šūnas. PC12 šūnu līnija ir klasisks neironu šūnu modelis, jo tā, iedarbojoties ar nervu augšanas faktoru (NGF), spēj iegūt simpātisko neironu īpašības.

Pētījumi par dopamīna regulāciju ir parādījuši, ka PC12 šūnas sintezē, atbrīvo un atpakaļsavāc dopamīnu un ir plaši raksturotas attiecībā uz neirosekrēciju un jonu kanālu un neirotransmiteru receptoru klātbūtni. Turklāt dažādu Ca kanālu apakštipu relatīvais īpatsvars diferenciācijas laikā mainās. PC12 šūnu līnija ir izveidots neironu šūnu modelis, kas ir īpaši noderīgs, pētot šūnu reakcijas uz nervu augšanas faktoriem (NGF) un to, kā tās izraisa diferenciācijai specifisku proteīnu ekspresiju un diferenciāciju. Kultivējot ar NGF, PC12 šūnas morfoloģiski un funkcionāli diferencējas par simpātisko gangliju neironiem. Diferenciācija notiek, NGF atgriezeniski inducējot neironu fenotipu. Pierādīts, ka kolagēna pārklājums labvēlīgi ietekmē neironu īpašību sasniegšanu neirītu garuma un blīvuma ziņā, apstrādājot ar NGF.

PC12 šūnas ir tumorigēnas, un tās iegūtas no New England Deaconess Hospital celma žurku tēviņiem. PC-12 šūnu līnijai ir 40 hromosomas, 38 autosomas un xY. PC12 šūnās ir izteikts nervu augšanas faktors (NGF), un NGF iedarbība ir viens no būtiskākajiem šūnu diferenciācijas regulatoriem.

Nobeigumā jāsecina, ka PC12 šūnas ir daudzpusīga un plaši izmantota modeļsistēma neirobioloģijā, pateicoties to spējai iegūt simpātisko neironu iezīmes, kad tās tiek pakļautas iedarbībai ar nervu augšanas faktoru (NGF). Šīm šūnām ir plaši raksturota neirosekrēcija, jonu kanāli un neirotransmiteru receptori. To ārkārtīgā daudzpusība farmakoloģisko testu veikšanai un izmantošana kā atzīts modelis neironu šūnu proliferācijas un diferenciācijas izpētei padara tās par vērtīgu instrumentu neirobioloģijas pētījumos.

Audums
Virsnieru dziedzeris
Slimība
Feohromocitoma
Metastāžu vieta
Neattiecas (adrenālo dziedzera medulas feohromocitoma; primārā audzēja lokalizācija ir adrenālais dziedzeris)
Pieteikumi
Neirobioloģijas pētījumi; NGF izraisīta neironu diferenciācija; dopamīna un kateholamīnu fizioloģija; neirosekrēcija; jonu kanāli (kalcija, nātrija); neirotransmiteru receptoru farmakoloģija; neiroprotekcijas skrīnings; Parkinsona slimības modeļi
Sinonīmi
  • PC 12
  • PC12

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
ĢMO statuss
Bez ĢMO
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Daudzstūris
Šūnu tips
Feohromocitomas šūnas (neiroendokrīnās/hromafīnas)
Tumorogēns
Jā, Jaunanglijas Diakonijas slimnīcas celma žurkas
Kariotips
40 hromosomas, 38 autosomas un xY

04Identifikatori

Atsauce
PC-12 (Cytion kataloga numurs 500311)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Nervu augšanas faktors (NGF)
Produkti
Kateholamīni, dopamīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
TrypLE Express (piestiprinās pie kolagēna); pipetējamā suspensija suspensijas kultūrai
Kolbas pārklājums
Kolagēns
Pārstādīšana
Suspensijas šūnas: Atdaliet šūnas no substrāta, pipetējot ar svaigu barotni. Lai iegūtu atsevišķas šūnas, suspensiju vairākas reizes izlaiž caur 22 collu adatu un iepilda jaunās kolbās. Audzēšana uz kolagēna: Lai atdalītu pielipušās šūnas, izmantot šādu standarta protokolu. Noņemt barotni un izskalot pielipušās šūnas, izmantojot PBS bez kalcija un magnija (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 šūnu kultūru kolbām). Pievienojiet TrypleExpress (1-2 ml uz T25, 2,5 ml uz T75 šūnu kultūru kolbu), šūnu sloksnei jābūt pilnībā pārklātai. Inkubēt 10 minūtes 37 °C temperatūrā. Uzmanīgi resuspendējiet šūnas, barotnes pievienošana nav obligāta, bet nav nepieciešama, un izlejiet jaunās kolbās, kurās ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts
Etniskā piederība
Japāņu