Skip to content
PC-12
Tissue
Tuyến thượng thận
Disease
U tuyến thượng thận
Metastatic site
Không áp dụng (u tế bào hắc tố tủy thượng thận; vị trí khối u nguyên phát là tuyến thượng thận)
Synonyms
PC 12, PC12

Documents

PC-12

Cell line · Product number 500311

PC-12 cells are a cell line derived from a pheochromocytoma of the rat adrenal medulla. These cells are of embryonic origin, grow adherently and resemble ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào PC-12 là dòng tế bào được phân lập từ u tủy thượng thận của chuột. Các tế bào này có nguồn gốc phôi thai, phát triển theo kiểu bám dính và có hình dạng giống như sự kết hợp giữa tế bào thần kinh và tế bào eosinophilic. Tế bào PC-12 là tế bào catecholamine, có khả năng tổng hợp, lưu trữ và giải phóng norepinephrine và dopamine. Chúng có đường kính khoảng 10-12 micron và là các tế bào nhỏ, có hình dạng không đều. Dòng tế bào PC12 là mô hình tế bào thần kinh cổ điển do khả năng phát triển các đặc điểm của tế bào thần kinh giao cảm khi tiếp xúc với yếu tố tăng trưởng thần kinh (NGF).

Các nghiên cứu về điều hòa dopamine đã chỉ ra rằng tế bào PC12 tổng hợp, giải phóng và tái hấp thu dopamine, và đã được đặc trưng chi tiết về tiết thần kinh, sự hiện diện của kênh ion và thụ thể chất dẫn truyền thần kinh. Hơn nữa, tỷ lệ tương đối của các loại kênh canxi khác nhau thay đổi trong quá trình biệt hóa. Dòng tế bào PC12 là một mô hình tế bào thần kinh đã được thiết lập, đặc biệt hữu ích trong việc nghiên cứu phản ứng tế bào đối với yếu tố tăng trưởng thần kinh (NGF) và cách thức chúng dẫn đến biểu hiện của các protein đặc hiệu phân hóa và quá trình phân hóa. Khi được nuôi cấy trong NGF, tế bào PC12 phân hóa thành các neuron ganglion giao cảm về mặt hình thái và chức năng. Quá trình biệt hóa xuất phát từ sự kích thích có thể đảo ngược của biểu hiện kiểu hình thần kinh bởi NGF. Lớp phủ collagen đã được chứng minh là có lợi cho việc đạt được các đặc điểm thần kinh về độ dài và mật độ của các nhánh thần kinh thông qua điều trị bằng NGF.

Tế bào PC12 có tính gây ung thư và được phân lập từ chuột đực thuộc dòng New England Deaconess Hospital. Dòng tế bào PC-12 có 40 nhiễm sắc thể, bao gồm 38 nhiễm sắc thể thường và xY. Yếu tố tăng trưởng thần kinh (NGF) được biểu hiện trong tế bào PC12, và việc tiếp xúc với NGF là một trong những yếu tố điều hòa quan trọng của quá trình biệt hóa tế bào.

Tóm lại, tế bào PC12 là một hệ thống mô hình linh hoạt và được sử dụng rộng rãi trong thần kinh học nhờ khả năng phát triển các đặc tính của tế bào thần kinh giao cảm khi tiếp xúc với yếu tố tăng trưởng thần kinh (NGF). Các tế bào này đã được nghiên cứu kỹ lưỡng về tiết thần kinh, kênh ion và thụ thể chất dẫn truyền thần kinh. Sự linh hoạt cao của chúng trong thử nghiệm dược lý và vai trò là mô hình đã được thiết lập để nghiên cứu sự phát triển và biệt hóa của tế bào thần kinh khiến chúng trở thành công cụ quý giá trong nghiên cứu thần kinh học.

Tissue
Tuyến thượng thận
Disease
U tuyến thượng thận
Metastatic site
Không áp dụng (u tế bào hắc tố tủy thượng thận; vị trí khối u nguyên phát là tuyến thượng thận)
Applications
Nghiên cứu sinh học thần kinh; sự biệt hóa tế bào thần kinh do NGF kích thích; sinh lý học dopamine và catecholamine; bài tiết thần kinh; các kênh ion (canxi, natri); dược lý học thụ thể chất dẫn truyền thần kinh; sàng lọc các phương pháp bảo vệ thần kinh; các mô hình bệnh Parkinson
Synonyms
  • PC 12
  • PC12

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Đa giác
Cell type
Tế bào u tế bào hắc tố (tế bào thần kinh nội tiết/chromaffin)
Tumourigenic
Đúng vậy, tại Bệnh viện New England Deaconess, chuột thí nghiệm
Karyotype
40 nhiễm sắc thể, bao gồm 38 nhiễm sắc thể thường và 2 nhiễm sắc thể giới tính (X và Y)

04Identifiers

Citation
PC-12 (Số catalog Cytion 500311)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Yếu tố tăng trưởng thần kinh (NGF)
Products
Catecholamine, dopamine

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
TrypLE Express (bám dính trên collagen); dung dịch pha loãng bằng ống hút để nuôi cấy dạng huyền phù
Flask coating
Collagen
Subculturing
Tế bào treo lơ lửng: Loại bỏ tế bào khỏi nền bằng cách hút bằng ống tiêm với môi trường tươi. Để thu được tế bào đơn lẻ, lọc tế bào lơ lửng qua kim 22 gauge nhiều lần và phân phối vào các bình nuôi cấy mới. Nuôi cấy trên collagen: Để tách tế bào bám dính, sử dụng quy trình tiêu chuẩn sau. Loại bỏ môi trường nuôi cấy và rửa tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (3-5 ml PBS cho bình T25, 5-10 ml cho bình T75). Thêm TrypleExpress (1-2 ml cho bình nuôi cấy T25, 2,5 ml cho bình nuôi cấy T75), lớp tế bào phải được phủ hoàn toàn. Ủ ở 37°C trong 10 phút. Cẩn thận tái phân tán tế bào, việc thêm môi trường là tùy chọn nhưng không bắt buộc, và phân phối vào các bình mới chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 48 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng hỗn hợp 50% môi trường cơ bản + 40% huyết thanh bò phôi (FBS) + 10% DMSO, hoặc CM-1 (số catalog Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện khả năng phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Không xác định
Ethnicity
Nhật Bản