Przejdź do treści
PC-12
Chusteczka
Nadnercza
Choroba
Guz chromochłonny
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (feochromocytoma rdzenia nadnerczy; pierwotną lokalizacją guza jest nadnercze)
Synonimy
PC 12, PC12

Dokumenty

PC-12

Cell line · Numer produktu 500311

Komórki PC-12 to linia komórkowa wyhodowana z guza chromochłonnego rdzenia nadnerczy szczura. Komórki te mają pochodzenie embrionalne, rosną w sposób adhezyjny i przypominają...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki PC-12 to linia komórkowa pochodząca z guza chromochłonnego rdzenia nadnerczy szczura. Komórki te są pochodzenia embrionalnego, rosną przylegająco i przypominają mieszaninę komórek neuroblastycznych i eozynofilowych. Komórki PC-12 są komórkami katecholaminowymi, które syntetyzują, przechowują i uwalniają noradrenalinę i dopaminę. Mają średnicę około 10-12 mikronów i są małymi komórkami o nieregularnym kształcie. Linia komórkowa PC12 jest klasycznym modelem komórek neuronalnych ze względu na jej zdolność do nabywania cech neuronów współczulnych pod wpływem czynnika wzrostu nerwów (NGF).

Badania nad regulacją dopaminy wykazały, że komórki PC12 syntetyzują, uwalniają i wychwytują dopaminę i zostały szeroko scharakteryzowane pod kątem neurosekrecji oraz obecności kanałów jonowych i receptorów neuroprzekaźników. Co więcej, względna proporcja różnych podtypów kanałów Ca zmienia się podczas różnicowania. Linia komórkowa PC12 jest uznanym modelem komórek neuronalnych, który jest szczególnie przydatny w badaniu odpowiedzi komórkowych na czynniki wzrostu nerwów (NGF) i tego, w jaki sposób prowadzą one do ekspresji białek specyficznych dla różnicowania i różnicowania. Komórki PC12 hodowane w NGF różnicują się morfologicznie i funkcjonalnie w neurony zwojów współczulnych. Różnicowanie wynika z odwracalnej indukcji fenotypu neuronalnego przez NGF. Wykazano, że powłoka kolagenowa jest korzystna dla uzyskania cech neuronalnych pod względem długości i gęstości neurytów w wyniku leczenia NGF.

Komórki PC12 są nowotworowe i pochodzą od samców szczurów szczepu New England Deaconess Hospital. Linia komórkowa PC-12 ma 40 chromosomów, 38 autosomów i xY. Czynnik wzrostu nerwów (NGF) ulega ekspresji w komórkach PC12, a ekspozycja na NGF jest jednym z kluczowych regulatorów różnicowania komórek.

Podsumowując, komórki PC12 są wszechstronnym i szeroko stosowanym systemem modelowym w neurobiologii ze względu na ich zdolność do nabywania cech neuronów współczulnych pod wpływem czynnika wzrostu nerwów (NGF). Komórki te zostały szeroko scharakteryzowane pod kątem neurosekrecji, kanałów jonowych i receptorów neuroprzekaźników. Ich wyjątkowa wszechstronność w testach farmakologicznych i zastosowanie jako uznany model do badania proliferacji i różnicowania komórek neuronalnych sprawiają, że są one cennym narzędziem w badaniach neurobiologicznych.

Chusteczka
Nadnercza
Choroba
Guz chromochłonny
Miejsce przerzutów
Nie dotyczy (feochromocytoma rdzenia nadnerczy; pierwotną lokalizacją guza jest nadnercze)
Zastosowania
Badania z zakresu neurobiologii; różnicowanie neuronów indukowane przez NGF; fizjologia dopaminy i katecholamin; neurosekrecja; kanały jonowe (wapniowe, sodowe); farmakologia receptorów neuroprzekaźników; badania przesiewowe w zakresie neuroprotekcji; modele choroby Parkinsona
Synonimy
  • PC 12
  • PC12

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Wielokątny
Typ komórki
Komórki guza chromochłonnego (neuroendokrynne/chromafinowe)
Nowotworotwórczy
Tak, w szczepie szczurów New England Deaconess Hospital
Karyotyp
40 chromosomów, 38 autosomów plus xY

04Identyfikatory

Źródło
PC-12 (numer katalogowy Cytion 500311)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Czynnik wzrostu nerwów (NGF)
Produkty
Katecholaminy, dopamina

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
TrypLE Express (przylegający do kolagenu); roztwór do pipetowania i resuspensji w hodowli w zawiesinie
Powłoka kolby
Kolagen
Hodowla komórek w subkulturze
Zawiesina komórek: Usunąć komórki z podłoża przez pipetowanie ze świeżą pożywką. Aby uzyskać pojedyncze komórki, przepuścić zawiesinę kilka razy przez igłę o rozmiarze 22 i dozować do nowych kolb. Wzrost na kolagenie: Aby usunąć przylegające komórki, użyj następującego standardowego protokołu. Usuń pożywkę i przepłucz przylegające komórki używając PBS bez wapnia i magnezu (3-5 ml PBS dla kolb T25, 5-10 ml dla kolb T75). Dodaj TrypleExpress (1-2 ml na kolbę T25, 2,5 ml na kolbę T75), arkusz komórek musi być całkowicie pokryty. Inkubować w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 10 minut. Ostrożnie ponownie zawiesić komórki, dodanie pożywki jest opcjonalne, ale nie jest konieczne, i przenieść do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy 50% pożywki podstawowej + 40% FBS + 10% DMSO lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
Nieokreślony
Pochodzenie etniczne
Japoński