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PC-12
ティッシュ
副腎
病気
褐色細胞腫
転移部位
該当なし(副腎髄質褐色細胞腫;原発部位は副腎)
同義語
PC 12, PC12

PC-12

Cell line · 製品番号 500311

PC-12細胞は、ラットの副腎髄質に発生した褐色細胞腫に由来する細胞株である。これらの細胞は胚由来であり、付着性増殖を示し、…に類似している。

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01概要

説明

PC-12細胞はラット副腎髄質の褐色細胞腫に由来する細胞株である。これらの細胞は胚由来で、接着性に増殖し、神経芽細胞と好酸球細胞の混合に似ている。PC-12細胞はカテコールアミン細胞で、ノルエピネフリンとドーパミンを合成、貯蔵、放出する。直径は約10-12ミクロンで、不規則な形をした小さな細胞である。PC12細胞株は、神経成長因子(NGF)を扱うと交感神経細胞の特徴を獲得する能力を持つため、古典的な神経細胞モデルである。

ドーパミンの調節に関する研究では、PC12細胞がドーパミンを合成、放出、再取り込みすることが示されており、神経分泌、イオンチャネルや神経伝達物質受容体の存在について広範に特徴付けられている。さらに、様々なサブタイプのCaチャネルの相対的な割合は、分化の過程で変化する。PC12細胞株は確立された神経細胞モデルであり、神経成長因子(NGF)に対する細胞応答や、それらが分化特異的タンパク質の発現や分化にどのようにつながるかを研究するのに特に有用である。NGF中で培養すると、PC12細胞は形態的にも機能的にも交感神経節ニューロンへと分化する。この分化は、NGFによって神経細胞の表現型が可逆的に誘導された結果である。コラーゲンコーティングは、NGF処理によって神経突起の長さと密度の点で神経細胞の特徴を獲得するのに有利であることが示されている。

PC12細胞は腫瘍形成性があり、雄のNew England Deaconess Hospital系統のラットに由来する。PC12細胞株は40本の染色体を持ち、38本の常染色体とxYを持つ。神経成長因子(NGF)はPC12細胞に発現しており、NGFへの暴露は細胞分化の重要な調節因子の一つである。

結論として、PC12細胞は、神経成長因子(NGF)を扱うと交感神経細胞の特徴を獲得する能力を持つため、神経生物学において多用途で広く用いられているモデル系である。これらの細胞は、神経分泌、イオンチャネル、神経伝達物質レセプターについて広範に特徴付けられてきた。薬理学的試験への極めて高い汎用性と、神経細胞の増殖と分化を研究するための確立されたモデルとしての使用により、神経生物学研究における貴重なツールとなっている。

ティッシュ
副腎
病気
褐色細胞腫
転移部位
該当なし(副腎髄質褐色細胞腫;原発部位は副腎)
用途
神経生物学の研究;NGFによる神経細胞分化;ドーパミンおよびカテコールアミンの生理学;神経分泌;イオンチャネル(カルシウム、ナトリウム);神経伝達物質受容体の薬理学;神経保護作用のスクリーニング;パーキンソン病モデル
同義語
  • PC 12
  • PC12

02分類

生物
ネズミ
セックス
男性
成長特性
付着状態および浮遊状態
GMOの有無
非遺伝子組み換え
GMOのステータスに関する詳細
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
多角形
細胞の種類
褐色細胞腫細胞(神経内分泌/クロマフィン)
腫瘍形成性
そう、ニューイングランド・ディーコネス病院のネズミの系統である。
核型
40本の染色体、38本の常染色体とxY染色体

04識別子

引用
PC-12(サイシオン カタログ番号 500311)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_S979

05発現と感受性

発現している受容体
神経成長因子(NGF)
製品
カテコールアミン、ドーパミン

06取り扱いと飼育

培地
RPMI1640、w:2.0mM安定グルタミン、w:2.0g/L NaHCO3(Cytion article number 820700a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
TrypLE Express(コラーゲン上での付着);懸濁培養用のピペッティングによる再懸濁
フラスコのコーティング
コラーゲン
継代培養
懸濁細胞:新しいメデュームでピペッティングし、細胞を基質から除去する。単一細胞を得るには、懸濁液を22ゲージの針に数回通し、新しいフラスコに分注する。コラーゲン上での増殖:接着細胞を除去するには、以下の標準プロトコールを使用する。培地を除去し、カルシウムとマグネシウムを含まないPBSで付着細胞をすすぐ(T25細胞培養フラスコでは3~5mlのPBS、T75細胞培養フラスコでは5~10mlのPBS)。TrypleExpress(T25用フラスコ1本につき1~2ml、T75用フラスコ1本につき2.5ml)を加え、細胞シートが完全に覆われるようにします。37℃で10分間インキュベートします。細胞を慎重に再懸濁します。培地の添加は任意ですが、必須ではありません。
播種密度
1 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも48時間行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、50%基礎培地+40%FBS+10%DMSO、またはCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用する。この培地には、回復を促進し、凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤が含まれている。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
特定せず
民族
日本語