Tartalomra ugrás
PC-12
Szövet
Mellékvese
Betegség
Phaeochromocytoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (a mellékvese medullájában kialakuló feokromocitóma; az elsődleges daganat helye a mellékvese)
Szinonimák
PC 12, PC12

Dokumentumok

PC-12

Cell line · Termékszám 500311

A PC-12 sejtek egy patkány mellékvese-medullájából származó feokromocitómából nyert sejtvonal. Ezek a sejtek embrionális eredetűek, adhezív módon szaporodnak, és hasonlítanak …

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A PC-12 sejtek a patkány mellékvesekéreg feokromocitómájából származó sejtvonal. Ezek a sejtek embrionális eredetűek, adherens módon növekednek és neuroblastikus és eozinofil sejtek keverékére hasonlítanak. A PC-12 sejtek katekolaminsejtek, amelyek noradrenalint és dopamint szintetizálnak, tárolnak és szabadítanak fel. Átmérőjük körülbelül 10-12 mikron, és kis, szabálytalan alakú sejtek. A PC12 sejtvonal klasszikus neuronális sejtmodellnek számít, mivel képes szimpatikus neuron tulajdonságokat felvenni, amikor idegnövekedési faktorral (NGF) foglalkozik.

A dopamin szabályozásával kapcsolatos vizsgálatok kimutatták, hogy a PC12 sejtek dopamint szintetizálnak, felszabadítanak és visszavesznek, és széles körben jellemezték őket a neuroszekréció, valamint az ioncsatornák és a neurotranszmitter-receptorok jelenléte szempontjából. Továbbá a Ca csatornák különböző altípusainak relatív aránya változik a differenciálódás során. A PC12 sejtvonal egy bevált neuronális sejtmodell, amely különösen hasznos az idegi növekedési faktorokra (NGF) adott sejtválaszok tanulmányozására, valamint annak vizsgálatára, hogy ezek hogyan vezetnek a differenciálódás-specifikus fehérjék kifejeződéséhez és a differenciálódáshoz. NGF-ben tenyésztve a PC12 sejtek morfológiailag és funkcionálisan szimpatikus ganglion neuronokká differenciálódnak. A differenciálódás a neuronális fenotípus NGF általi reverzibilis indukciójának eredménye. Kimutatták, hogy a kollagénbevonat kedvezően hat a neuronális jellemzők elérésére a neuriták hossza és sűrűsége tekintetében NGF-kezeléssel.

A PC12 sejtek tumorigén sejtek, és hím New England Deaconess Hospital törzsű patkányokból származnak. A PC-12 sejtvonal 40 kromoszómával rendelkezik, 38 autoszómával, valamint xY-val. Az idegnövekedési faktor (NGF) kifejeződik a PC12 sejtekben, és az NGF-expozíció a sejtdifferenciálódás egyik döntő szabályozója.

Összefoglalva, a PC12 sejtek sokoldalú és széles körben használt modellrendszerek a neurobiológiában, mivel képesek szimpatikus neuronok jellemzőit elsajátítani, ha idegnövekedési faktorral (NGF) foglalkoznak. Ezeket a sejteket széles körben jellemezték a neuroszekréció, az ioncsatornák és a neurotranszmitter-receptorok tekintetében. Rendkívül sokoldalúságuk a farmakológiai vizsgálatokhoz és a neuronális sejtek proliferációjának és differenciálódásának tanulmányozására létrehozott modellként való használatuk értékes eszközzé teszi őket a neurobiológiai kutatásban.

Szövet
Mellékvese
Betegség
Phaeochromocytoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (a mellékvese medullájában kialakuló feokromocitóma; az elsődleges daganat helye a mellékvese)
Alkalmazások
Neurobiológiai kutatás; NGF által indukált idegsejt-differenciálódás; dopamin- és katekolamin-fiziológia; neuroszekréció; ioncsatornák (kalcium, nátrium); neurotranszmitter-receptorok farmakológiája; neuroprotektív szűrés; Parkinson-kór modellek
Szinonimák
  • PC 12
  • PC12

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Adherens és szuszpenziós
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype rat pheochromocytoma cell line
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Poligonális
Sejttípus
Feokromocitóma-sejtek (neuroendokrin/kromaffin)
Daganatképző
Igen, a New England Deaconess Kórházban patkányok törzsében
Kariotípus
40 kromoszóma, 38 autoszóma plusz xY

04Azonosítók

Hivatkozás
PC-12 (Cytion katalógusszám: 500311)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_S979

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Ideg növekedési faktor (NGF)
Termékek
Katekolaminok, dopamin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
TrypLE Express (kollagénhez kötődő); pipettázással történő reszuszpenzió szuszpenziós tenyésztéshez
A palack bevonata
Kollagén
Átültetés
Szuszpenziós sejtek: A sejteket friss tápfolyadékkal pipettázva távolítsuk el a hordozóról. Az egyes sejtek kinyeréséhez a szuszpenziót többször át kell vezetni egy 22-es tűn, és új lombikokba kell adagolni. Kollagénen történő tenyésztés: A megtapadt sejtek eltávolításához használja a következő standard protokollt. Távolítsa el a tápfolyadékot, és öblítse le a megtapadt sejteket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 sejttenyésztő lombikok esetében). Adjon hozzá TrypleExpress-t (1-2ml T25-ös, 2,5ml T75-ös sejttenyésztő lombikban), a sejtlapot teljesen be kell fednie. Inkubáljuk 37 Celsius-fokon 10 percig. Óvatosan reszuszpendálja a sejteket, a tápfolyadék hozzáadása opcionális, de nem szükséges, és adagolja új lombikokba, amelyek friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
1 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel a lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felépüljenek a fagyasztási folyamatból, és legalább 48 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
A kriokonzerváláshoz 50%-os alapközeget + 40% FBS + 10% DMSO-t vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100) használunk, amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regeneráció fokozása és a krioindukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Meghatározatlan
Etnikai hovatartozás
Japán