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Sp2/0-Ag14
Tissu
Le sang
Maladie
Hybridome de cellules B
Synonymes
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Documents

Sp2/0-Ag14

Cell line · Référence du produit 400481

La lignée cellulaire Sp2/0-Ag14, communément appelée Sp2/0, est une lignée cellulaire de myélome murin largement utilisée pour la production d'anticorps monoclonaux. Origine...

€430.00hors taxes et frais de port
Stock limité
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire Sp2/0-Ag14, communément appelée Sp2/0, est une lignée cellulaire de myélome murin largement utilisée pour la production d'anticorps monoclonaux. Issue de la souche de souris BALB/c, cette lignée cellulaire a été développée en fusionnant des cellules de la rate de souris immunisées avec des cellules de myélome dépourvues de l'enzyme hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (HGPRT). Cette déficience rend les cellules Sp2/0 incapables de survivre en milieu HAT (hypoxanthine, aminoptérine, thymidine), une caractéristique cruciale pour la sélection des hybridomes lorsqu'elles sont fusionnées avec des cellules de la rate de souris immunisées, car seules les cellules d'hybridomes peuvent proliférer dans ce milieu sélectif.

La lignée cellulaire Sp2/0-Ag14 se caractérise par sa stabilité et sa robustesse en culture cellulaire, ce qui en fait un hôte privilégié pour la production d'hybridomes. L'absence de production d'immunoglobulines dans ces cellules est une caractéristique essentielle car elle empêche la sécrétion d'immunoglobulines endogènes qui pourraient interférer avec l'anticorps monoclonal produit par les hybridomes. Cette lignée cellulaire a été largement utilisée dans la recherche scientifique et les applications industrielles pour la production d'anticorps monoclonaux contre un large éventail d'antigènes. Les anticorps produits sont utilisés dans la recherche, le diagnostic et les applications thérapeutiques, soulignant l'utilité significative de la lignée cellulaire Sp2/0 dans les industries biotechnologiques et pharmaceutiques.

Tissu
Le sang
Maladie
Hybridome de cellules B
Synonymes
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
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  • SP2/0 Ag-14
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  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
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  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adhérent et en suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules rondes

04Identifiants

Référence
Sp2/0-Ag14 (numéro de catalogue Cytion 400481)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
H-2d
Virus
Testé et trouvé négatif pour le virus de l'ectromélie (mousepox).

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Repiquage
Recueillir le milieu avec les cellules flottantes dans un tube de microcentrifugation. Rincer les cellules adhérentes avec du PBS sans calcium ni magnésium (3-5 ml de PBS pour T25, 5-10 ml pour les flacons de culture cellulaire T75). Ajouter l'Accutase (1-2ml par T25, 2,5ml par flacon de culture cellulaire T75), la feuille de cellules doit être complètement recouverte. Incuber à 37 degrés Celsius pendant 10 minutes. Combiner les cellules flottantes et les cellules détachées dans un tube, centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Remettre soigneusement les cellules en suspension dans du milieu frais et les répartir dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Densité de semis
Maintenir la densité cellulaire entre 5 x 104 et 5 x 106 cellules viables/ml.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
BALB/c