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- Tecido
- Sangue
- Doença
- Hibridoma de células B
- Sinónimos
- SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D
Documentos
Sp2/0-Ag14
Cell line · Número do produto 400481
A linha celular Sp2/0-Ag14, comummente designada por Sp2/0, é uma linha celular de mieloma murino amplamente utilizada na produção de anticorpos monoclonais. Origem...
Personalização / Recomendações
- Sp2/0-Ag14Cell line€430.00
Recomendado (lote mais recente)
01Informações gerais
- Descrição
A linha celular Sp2/0-Ag14, comummente designada por Sp2/0, é uma linha celular de mieloma murino utilizada extensivamente para a produção de anticorpos monoclonais. Originária da estirpe de ratinhos BALB/c, esta linha celular foi desenvolvida através da fusão de células do baço de ratinhos imunizados com células de mieloma que não possuem a enzima hipoxantina-guanina fosforibosiltransferase (HGPRT). Esta deficiência torna as células Sp2/0 incapazes de sobreviver em meio HAT (hipoxantina, aminopterina, timidina), uma caraterística crucial para a seleção de hibridomas quando fundidas com células do baço de ratinhos imunizados, uma vez que apenas as células do hibridoma podem proliferar neste meio seletivo.
A linha celular Sp2/0-Ag14 caracteriza-se pela sua estabilidade e robustez em cultura celular, o que a torna um hospedeiro preferencial para a produção de hibridomas. A ausência de produção de imunoglobulinas nestas células é uma caraterística crítica, porque impede a secreção de imunoglobulinas endógenas que poderiam interferir com o anticorpo monoclonal produzido pelos hibridomas. Esta linha celular tem sido amplamente utilizada na investigação científica e em aplicações industriais para gerar anticorpos monoclonais contra uma vasta gama de antigénios. Os anticorpos produzidos são utilizados na investigação, no diagnóstico e em aplicações terapêuticas, realçando a utilidade significativa da linha celular Sp2/0 nas indústrias biotecnológica e farmacêutica.
- Tecido
- Sangue
- Doença
- Hibridoma de células B
- Sinónimos
- SP2/0-Ag14
- SP2/0-AG14
- SP2/0-ag14
- Sp2/O-Ag14
- SP2/O-Ag14
- Sp2/0-Ag-14
- SP2-0-Ag14
- SP2/0 Ag-14
- SP-2/0-AG14
- Sp 2/0-Ag 14
- Sp2/0
- SP2/0
- Sp2/O
- SP2/O
- SP-2
- SP2
- GM03569
- GM3569
- GM03569B
- GM3569B
- GM03569D
02Classificação
- Organismo
- Rato
- Propriedades de crescimento
- Adesão e suspensão
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- Células redondas
04Identificadores
- Referência
- Sp2/0-Ag14 (número de catálogo Cytion 400481)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2199
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão do antígeno
- H-2d
- Vírus
- Testado e considerado negativo para o vírus da ectromelia (varíola do rato).
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Subcultura
- Recolher o meio com células flutuantes num tubo de microcentrifugação. Lavar as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (3-5 ml de PBS para T25, 5-10 ml para frascos de cultura de células T75). Adicionar Accutase (1-2 ml por T25, 2,5 ml por frasco de cultura de células T75), devendo a folha de células ser completamente coberta. Incubar a 37 graus Celsius durante 10 minutos. Combinar as células flutuantes e as células separadas num tubo e centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Ressuspender cuidadosamente as células em meio fresco e distribuir em novos frascos que contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- Mantenha a densidade celular entre 5 x 104 e 5 x 106 células viáveis/ml.
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Raça / subespécie
- BALB/c
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Aviso legal
- As nossas células são fornecidas exclusivamente para fins de investigação laboratorial in vitro e não se destinam a utilização clínica ou de diagnóstico, nem devem ser administradas a seres humanos ou utilizadas para fins veterinários. Os utilizadores devem aderir a todas as diretrizes e regulamentos aplicáveis para o manuseamento e utilização destas células num ambiente de investigação.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim