İçeriğe atla
Sp2/0-Ag14
Doku
Kan
Hastalık
B hücre hibridomu
Eş anlamlılar
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Sp2/0-Ag14

Cell line · Ürün numarası 400481

Genellikle Sp2/0 olarak anılan Sp2/0-Ag14 hücre hattı, monoklonal antikorların üretiminde yaygın olarak kullanılan bir fare miyelom hücre hattıdır. Kökeni...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Genellikle Sp2/0 olarak adlandırılan Sp2/0-Ag14 hücre hattı, monoklonal antikorların üretimi için yaygın olarak kullanılan bir murin miyelom hücre hattıdır. BALB/c fare soyundan gelen bu hücre hattı, bağışıklık kazandırılmış farelerin dalak hücrelerinin hipoksantin-guanin fosforibosiltransferaz (HGPRT) enziminden yoksun miyelom hücreleriyle kaynaştırılmasıyla geliştirilmiştir. Bu eksiklik, Sp2/0 hücrelerinin HAT (hipoksantin, aminopterin, timidin) ortamında hayatta kalamamasına neden olur; bu özellik, aşılanmış farelerden alınan dalak hücreleriyle kaynaştırıldığında hibridoma seçimi için çok önemlidir, çünkü bu seçici ortamda yalnızca hibridoma hücreleri çoğalabilir.

Sp2/0-Ag14 hücre hattı, hücre kültüründeki stabilitesi ve sağlamlığı ile karakterize edilir, bu da onu hibridoma üretimi için tercih edilen bir konakçı yapar. Bu hücrelerde immünoglobulin üretiminin olmaması kritik bir özelliktir çünkü hibridomlar tarafından üretilen monoklonal antikorla etkileşime girebilecek endojen immünoglobulinlerin salgılanmasını önler. Bu hücre hattı, çok çeşitli antijenlere karşı monoklonal antikorlar üretmek için bilimsel araştırmalarda ve endüstriyel uygulamalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Üretilen antikorlar araştırma, teşhis ve terapötik uygulamalarda kullanılmakta ve Sp2/0 hücre hattının biyoteknoloji ve ilaç endüstrilerindeki önemli faydasını vurgulamaktadır.

Doku
Kan
Hastalık
B hücre hibridomu
Eş anlamlılar
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Yuvarlak hücreler

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
Sp2/0-Ag14 (Cytion katalog numarası 400481)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
H-2d
Virüsler
Ektromelia virüsü (fare çiçeği) için test edilmiş ve negatif bulunmuştur.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Alt kültür oluşturma
Yüzen hücrelerin bulunduğu ortamı bir mikrosantrifüj tüpünde toplayın. Yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS kullanarak durulayın (T25 için 3-5 ml PBS, T75 hücre kültürü şişeleri için 5-10 ml). Accutase ekleyin (T25 başına 1-2 ml, T75 hücre kültürü şişesi başına 2,5 ml), hücre tabakası tamamen kaplanmalıdır. 37 santigrat derecede 10 dakika inkübe edin. Yüzen hücreleri ve ayrılmış hücreleri bir tüpte birleştirin, 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Hücreleri taze besiyerinde dikkatlice yeniden süspanse edin ve taze besiyeri içeren yeni şişelere dağıtın.
Ekim yoğunluğu
Hücre yoğunluğunu 5 x 104 ile 5 x 106 canlı hücre/ml arasında tutun.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c