Gå til innholdet
Sp2/0-Ag14
Vev
Blod
Sykdom
B-cellehybridom
Synonymer
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumenter

Sp2/0-Ag14

Cell line · Produktnummer 400481

Cellelinjen Sp2/0-Ag14, ofte kalt Sp2/0, er en myelomcellelinje fra mus som brukes i stor utstrekning til produksjon av monoklonale antistoffer. Opprinnelig...

€430.00ekskl. mva. og frakt
Lite på lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Sp2/0-Ag14-cellelinjen, ofte referert til som Sp2/0, er en myelomcellelinje fra mus som brukes i stor utstrekning til produksjon av monoklonale antistoffer. Denne cellelinjen stammer fra BALB/c-musestammen, og ble utviklet ved å fusjonere miltceller fra immuniserte mus med myelomceller som mangler enzymet hypoksantin-guanin-fosforibosyltransferase (HGPRT). Denne mangelen gjør at Sp2/0-celler ikke kan overleve i HAT-medium (hypoksantin, aminopterin, tymidin), noe som er avgjørende for hybridomseleksjon når de fusjoneres med miltceller fra immuniserte mus, ettersom bare hybridomcellene kan formere seg i dette selektive mediet.

Sp2/0-Ag14-cellelinjen kjennetegnes av stabilitet og robusthet i cellekultur, noe som gjør den til en foretrukket vert for hybridomproduksjon. Fraværet av immunglobulinproduksjon i disse cellene er en kritisk egenskap fordi det forhindrer utskillelse av endogene immunglobuliner som kan interferere med det monoklonale antistoffet som produseres av hybridomene. Denne cellelinjen har vært mye brukt i vitenskapelig forskning og industrielle anvendelser for å generere monoklonale antistoffer mot en lang rekke antigener. Antistoffene som produseres, brukes i forskning, diagnostikk og terapi, noe som understreker Sp2/0-cellelinjens store nytteverdi i bioteknologisk og farmasøytisk industri.

Vev
Blod
Sykdom
B-cellehybridom
Synonymer
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klassifisering

Organisme
Mus
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Sp2/0-Ag14 (Cytion-katalognummer 400481)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
H-2d
Virus
Testet og funnet negativ for ektromelia-virus (musekopper).

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Samle opp medium med flytende celler i et mikrosentrifugerør. Skyll de adherente cellene med PBS uten kalsium og magnesium (3-5 ml PBS for T25, 5-10 ml for T75-celledyrkningsflasker). Tilsett Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75-cellekulturkolbe), cellearket må være helt dekket. Inkuber ved 37 grader Celsius i 10 minutter. Kombiner de flytende cellene og de løsrevne cellene i ett rør, sentrifuger ved 300xg i 3 minutter. Resuspender cellene forsiktig i nytt medium, og fordel dem i nye kolber som inneholder nytt medium.
Såtetthet
Oppretthold celletettheten mellom 5 x 104 og 5 x 106 levedyktige celler/ml.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
BALB/c