Премини към съдържанието
Sp2/0-Ag14
Тъкан
Кръв
Заболяване
В-клетъчен хибридом
Синоними
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Документи

Sp2/0-Ag14

Cell line · Номер на продукта 400481

Клетъчната линия Sp2/0-Ag14, обикновено наричана Sp2/0, е миши миеломна клетъчна линия, широко използвана за производството на моноклонални антитела. Произход...

€430.00без ДДС и доставка
Наличността е ниска
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия Sp2/0-Ag14, обикновено наричана Sp2/0, е клетъчна линия от миелом на мишки, която се използва широко за производство на моноклонални антитела. Тази клетъчна линия, произхождаща от мишия щам BALB/c, е разработена чрез сливане на клетки от слезка от имунизирани мишки с миеломни клетки, в които липсва ензимът хипоксантин-гуанин фосфорибозилтрансфераза (HGPRT). Този дефицит прави клетките Sp2/0 неспособни да оцелеят в среда HAT (хипоксантин, аминоптерин, тимидин), характеристика, която е от решаващо значение за селекцията на хибридоми при сливане със слезката от имунизирани мишки, тъй като само хибридомните клетки могат да се размножават в тази селективна среда.

Клетъчната линия Sp2/0-Ag14 се характеризира със своята стабилност и устойчивост в клетъчна култура, което я прави предпочитан носител за производство на хибридоми. Липсата на производство на имуноглобулини в тези клетки е критична характеристика, тъй като предотвратява секрецията на ендогенни имуноглобулини, които биха могли да попречат на моноклоналните антитела, произведени от хибридомите. Тази клетъчна линия е широко използвана в научните изследвания и промишлените приложения за генериране на моноклонални антитела срещу широк набор от антигени. Произведените антитела се използват в научни изследвания, диагностика и терапевтични приложения, което подчертава значителната полезност на клетъчната линия Sp2/0 в биотехнологичната и фармацевтичната промишленост.

Тъкан
Кръв
Заболяване
В-клетъчен хибридом
Синоними
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Кръгли клетки

04Идентификатори

Източник
Sp2/0-Ag14 (каталожен номер на Cytion 400481)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_2199

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
H-2d
Вируси
Изследване и отрицателен резултат за вируса на ектромелия (миша едра шарка).

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Съберете средата с плаващите клетки в микроцентрофужна епруветка. Изплакнете прилепналите клетки с PBS без калций и магнезий (3-5 ml PBS за колби T25, 5-10 ml за колби T75). Добавете Accutase (1-2 ml за Т25, 2,5 ml за колба за клетъчни култури Т75), като клетъчният лист трябва да бъде покрит напълно. Инкубирайте при 37 градуса по Целзий в продължение на 10 минути. Комбинирайте плаващите клетки и отделените клетки в една епруветка, центрофугирайте при 300xg за 3 min. Внимателно ресуспендирайте клетките в свежа среда и ги разпределете в нови колби, които съдържат свежа среда.
Плътност на засяването
Поддържайте клетъчната плътност между 5 x 104 и 5 x 106 жизнеспособни клетки/ml.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/c