Přejít na obsah
Sp2/0-Ag14
Tkáň
Krev
Nemoc
B buněčný hybridom
Synonyma
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumenty

Sp2/0-Ag14

Cell line · Číslo výrobku 400481

Buněčná linie Sp2/0-Ag14, běžně označovaná jako Sp2/0, je myší myelomová buněčná linie, která se hojně využívá k výrobě monoklonálních protilátek. Původ...

€430.00bez DPH a poštovného
Nízký stav zásob
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie Sp2/0-Ag14, běžně označovaná jako Sp2/0, je myší myelomová buněčná linie hojně využívaná k výrobě monoklonálních protilátek. Tato buněčná linie pochází z myšího kmene BALB/c a byla vyvinuta spojením buněk sleziny imunizovaných myší s myelomovými buňkami, které postrádají enzym hypoxantin-guaninfosforibosyltransferázu (HGPRT). Tento nedostatek způsobuje, že buňky Sp2/0 nejsou schopny přežívat v médiu HAT (hypoxantin, aminopterin, thymidin), což je při fúzi se slezinnými buňkami imunizovaných myší klíčová vlastnost pro selekci hybridomů, protože v tomto selektivním médiu se mohou množit pouze hybridomové buňky.

Buněčná linie Sp2/0-Ag14 se vyznačuje stabilitou a odolností v buněčné kultuře, což z ní činí preferovaného hostitele pro produkci hybridomů. Absence produkce imunoglobulinů v těchto buňkách je kritickou vlastností, protože zabraňuje sekreci endogenních imunoglobulinů, které by mohly interferovat s monoklonálními protilátkami produkovanými hybridomy. Tato buněčná linie se hojně používá ve vědeckém výzkumu a v průmyslových aplikacích pro tvorbu monoklonálních protilátek proti široké škále antigenů. Vyrobené protilátky se používají ve výzkumu, diagnostice a terapeutických aplikacích, což poukazuje na významnou užitečnost buněčné linie Sp2/0 v biotechnologickém a farmaceutickém průmyslu.

Tkáň
Krev
Nemoc
B buněčný hybridom
Synonyma
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Kulaté buňky

04Identifikátory

Citace
Sp2/0-Ag14 (katalogové číslo Cytion 400481)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
H-2d
Viry
Testy na virus ektromelie (myší neštovice) byly negativní.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Shromážděte médium s plovoucími buňkami do mikrocentrifugační zkumavky. Propláchněte adherující buňky pomocí PBS bez vápníku a hořčíku (3-5 ml PBS pro baňky T25, 5-10 ml pro baňky T75). Přidejte Accutase (1-2 ml na T25, 2,5 ml na baňku s buněčnou kulturou T75), buněčný list musí být zcela pokryt. Inkubujte při teplotě 37 °C po dobu 10 minut. Spojte plovoucí buňky a oddělené buňky v jedné zkumavce, odstřeďujte při 300xg po dobu 3 min. Buňky opatrně resuspendujte v čerstvém médiu a rozdělte do nových baněk, které obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
Udržujte hustotu buněk mezi 5 x 104 a 5 x 106 životaschopných buněk/ml.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c