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Sp2/0-Ag14
ティッシュ
血液
病気
B細胞ハイブリドーマ
同義語
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Sp2/0-Ag14

Cell line · 製品番号 400481

Sp2/0-Ag14細胞株(一般にSp2/0と呼ばれる)は、モノクローナル抗体の生産に広く用いられているマウス骨髄腫細胞株である。起源は...

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01概要

説明

Sp2/0-Ag14細胞株は、一般にSp2/0と呼ばれ、モノクローナル抗体の生産に広く用いられているマウス骨髄腫細胞株である。BALB/cマウス系統に由来するこの細胞株は、免疫マウスの脾臓細胞と、酵素ヒポキサンチン・グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ(HGPRT)を欠損した骨髄腫細胞との融合によって開発された。この欠損により、Sp2/0細胞はHAT(ヒポキサンチン、アミノプテリン、チミジン)培地では生存できなくなる。この選択的培地ではハイブリドーマ細胞のみが増殖できるため、免疫マウスの脾臓細胞と融合させた場合、ハイブリドーマの選択に極めて重要な機能となる。

Sp2/0-Ag14細胞株は、細胞培養における安定性と頑健性が特徴であり、ハイブリドーマ産生に好ましい宿主である。ハイブリドーマが産生するモノクローナル抗体と干渉する可能性のある内因性免疫グロブリンの分泌を防ぐため、この細胞では免疫グロブリンが産生されないことが重要な特徴である。この細胞株は、広範な抗原に対するモノクローナル抗体の作製に、科学研究および産業応用において広く使用されている。産生された抗体は研究、診断、治療用途に使用されており、バイオテクノロジーおよび製薬産業におけるSp2/0細胞株の有用性が強調されている。

ティッシュ
血液
病気
B細胞ハイブリドーマ
同義語
  • SP2/0-Ag14
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  • Sp2/O-Ag14
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  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
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  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02分類

生物
マウス
成長特性
付着状態および浮遊状態
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
丸い細胞

04識別子

引用
Sp2/0-Ag14 (Cytion カタログ番号 400481)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_2199

05発現と感受性

抗原発現
H-2d
ウイルス
検査の結果、エクトロメリアウイルス(ネズミ痘)は陰性であった。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
継代培養
細胞が浮遊している培地を微量遠心チューブに回収する。カルシウムとマグネシウムを除いたPBS(T25は3-5ml、T75は5-10ml)で付着細胞をすすぐ。アキュターゼを加える(T25細胞培養フラスコ1本につき1-2ml、T75細胞培養フラスコ1本につき2.5ml)。37℃で10分間インキュベートする。浮遊細胞と剥離細胞を1つのチューブに入れ、300xgで3分間遠心する。細胞を新しいメデュームに慎重に再懸濁し、新しいメデュームを入れた新しいフラスコに分注する。
播種密度
細胞密度を5×10⁴~5×10⁶生存細胞/mlの範囲に維持する。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
BALB/c