Sp2/0-Ag14

A linhagem celular Sp2/0-Ag14, comumente chamada de Sp2/0, é uma linhagem de células de mieloma murino amplamente utilizada para a produção de anticorpos monoclonais. Originária da linhagem de camundongos BALB/c, essa linhagem celular foi desenvolvida por meio da fusão de células do baço de camundongos imunizados com células de mieloma que não possuem a enzima hipoxantina-guanina fosforibosiltransferase (HGPRT). Essa deficiência torna as células Sp2/0 incapazes de sobreviver no meio HAT (hipoxantina, aminopterina, timidina), uma característica crucial para a seleção de hibridomas quando fundidas com células do baço de camundongos imunizados, já que apenas as células de hibridoma podem proliferar nesse meio seletivo.

A linhagem celular Sp2/0-Ag14 é caracterizada por sua estabilidade e robustez em cultura celular, tornando-a um hospedeiro preferencial para a produção de hibridomas. A ausência de produção de imunoglobulinas nessas células é uma característica crítica, pois impede a secreção de imunoglobulinas endógenas que poderiam interferir no anticorpo monoclonal produzido pelos hibridomas. Essa linhagem celular tem sido amplamente utilizada em pesquisas científicas e aplicações industriais para a geração de anticorpos monoclonais contra uma ampla variedade de antígenos. Os anticorpos produzidos são utilizados em pesquisa, diagnóstico e aplicações terapêuticas, destacando a utilidade significativa da linhagem celular Sp2/0 nas indústrias biotecnológica e farmacêutica.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.