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- Tissue
- 血液
- Disease
- B 细胞杂交瘤
- Synonyms
- SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D
Documents
Sp2/0-Ag14
Cell line · Product number 400481
The Sp2/0-Ag14 cell line, commonly referred to as Sp2/0, is a murine myeloma cell line used extensively for the production of monoclonal antibodies. Origi...
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01General information
- Description
Sp2/0-Ag14细胞系通常被称为Sp2/0,是一种广泛用于生产单克隆抗体的小鼠骨髓瘤细胞系。该细胞系源于 BALB/c 小鼠品系,是通过将免疫小鼠的脾脏细胞与缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)的骨髓瘤细胞融合而成。这种缺陷使 Sp2/0 细胞无法在 HAT(次黄嘌呤、氨蝶呤、胸腺嘧啶)培养基中存活,而当与免疫小鼠的脾脏细胞融合时,这一特性对杂交瘤的筛选至关重要,因为只有杂交瘤细胞才能在这种选择性培养基中增殖。
Sp2/0-Ag14 细胞系在细胞培养中具有稳定性和稳健性的特点,使其成为杂交瘤生产的首选宿主。这些细胞不产生免疫球蛋白是一个重要特征,因为它能防止内源性免疫球蛋白的分泌,以免干扰杂交瘤产生的单克隆抗体。这种细胞系已被广泛用于科学研究和工业应用,用于产生针对多种抗原的单克隆抗体。所产生的抗体可用于研究、诊断和治疗,这凸显了 Sp2/0 细胞系在生物技术和制药业中的重要作用。
- Tissue
- 血液
- Disease
- B 细胞杂交瘤
- Synonyms
- SP2/0-Ag14
- SP2/0-AG14
- SP2/0-ag14
- Sp2/O-Ag14
- SP2/O-Ag14
- Sp2/0-Ag-14
- SP2-0-Ag14
- SP2/0 Ag-14
- SP-2/0-AG14
- Sp 2/0-Ag 14
- Sp2/0
- SP2/0
- Sp2/O
- SP2/O
- SP-2
- SP2
- GM03569
- GM3569
- GM03569B
- GM3569B
- GM03569D
02Classification
- Organism
- Mouse
- Growth properties
- Adherent and suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 圆形电池
04Identifiers
- Citation
- Sp2/0-Ag14(Cytion 目录号 400481)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_2199
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- H-2d
- Viruses
- 经检测,外胚叶病毒(鼠痘)呈阴性。
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Subculturing
- 在微离心管中收集带有漂浮细胞的培养基。用不含钙和镁的 PBS 冲洗粘附的细胞(T25 细胞培养皿用 3-5 毫升 PBS,T75 细胞培养皿用 5-10 毫升)。加入 Accutase(每个 T25 细胞培养瓶 1-2 毫升,每个 T75 细胞培养瓶 2.5 毫升),细胞片必须完全覆盖。在 37 摄氏度下孵育 10 分钟。将漂浮的细胞和分离的细胞混合在一个试管中,300xg 离心 3 分钟。小心地将细胞重悬于新鲜培养基中,然后分装到装有新鲜培养基的新培养瓶中。
- Seeding density
- 保持细胞密度在5×10⁴至5×10⁶活细胞/毫升之间。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时,必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时,必须穿戴适当的防护手套和防护服,并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险,因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Disclaimer
- 我们提供的细胞仅用于体外实验室研究目的,不用于临床或诊断用途,也不得用于人类或兽医目的。用户必须遵守在研究环境中处理和使用这些细胞的所有适用准则和法规。
- Warranty
在Cytion,我们保证产品的质量和活力。 我们保证,从我们的工厂发货后 60 天内,我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息,请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes