الانتقال إلى المحتوى
Sp2/0-Ag14
الأنسجة
الدم
المرض
الورم المهجن الخلوي البائي
المرادفات
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

المستندات

Sp2/0-Ag14

Cell line · رقم المنتج 400481

سلسلة الخلايا Sp2/0-Ag14، التي يُشار إليها عادةً باسم Sp2/0، هي سلسلة خلايا المايلوما الفئرانية التي تُستخدم على نطاق واسع لإنتاج الأجسام المضادة أحادية النسيلة. الأصل...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
مخزون منخفض
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

الخط الخلوي Sp2/0-Ag14، الذي يُشار إليه عادةً باسم Sp2/0، هو خط خلوي للورم النقوي للفئران يُستخدم على نطاق واسع لإنتاج الأجسام المضادة أحادية النسيلة. تم تطوير هذا الخط الخلوي الذي نشأ من سلالة الفأر BALB/c، عن طريق دمج خلايا الطحال من الفئران المحصنة مع خلايا الورم النقوي التي تفتقر إلى إنزيم هيبوكسانثين-غوانين فوسفوريبوسيل ترانسفيراز (HGPRT). هذا النقص يجعل خلايا Sp2/0 غير قادرة على البقاء على قيد الحياة في وسط HAT (هيبوكسانثين وأمينوبترين وثيميدين)، وهي ميزة حاسمة لانتقاء الورم المهجن عند دمجها مع خلايا الطحال من الفئران المحصنة، حيث يمكن لخلايا الورم المهجن فقط أن تتكاثر في هذا الوسط الانتقائي.

يتميز الخط الخلوي Sp2/0-Ag14 بثباته وقوته في المستنبت الخلوي، مما يجعله المضيف المفضل لإنتاج الورم المهجن. ويُعد غياب إنتاج الغلوبولين المناعي في هذه الخلايا سمة بالغة الأهمية لأنه يمنع إفراز الغلوبولين المناعي الداخلي الذي يمكن أن يتداخل مع الأجسام المضادة أحادية النسيلة التي تنتجها الأورام المهجنة. تم استخدام هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في الأبحاث العلمية والتطبيقات الصناعية لتوليد أجسام مضادة أحادية النسيلة ضد مجموعة واسعة من المستضدات. وتستخدم الأجسام المضادة المنتجة في الأبحاث والتشخيص والتطبيقات العلاجية، مما يسلط الضوء على الفائدة الكبيرة لخط الخلايا Sp2/0 في الصناعات التكنولوجية الحيوية والصيدلانية.

الأنسجة
الدم
المرض
الورم المهجن الخلوي البائي
المرادفات
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الخلايا الدائرية

04المعرّفات

المرجع
Sp2/0-Ag14 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 400481)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_2199

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
ح-2د
الفيروسات
تم اختباره ووجد أنه سلبي لفيروس إكتروميليا (جدري الفئران).

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
جمع الوسط مع الخلايا العائمة في أنبوب طرد مركزي دقيق. اشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). إضافة أكوتاز (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. تُمزج الخلايا العائمة والخلايا المنفصلة في أنبوب واحد، وتُطرد مركزيًا عند 300xg لمدة 3 دقائق. يُعاد غمر الخلايا بعناية في وسط جديد ويتم توزيعها في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
حافظ على كثافة الخلايا بين 5 × 104 و 5 × 106 خلية قابلة للحياة/مل.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
بالب/ج