Sp2/0-Ag14

La lignée cellulaire Sp2/0-Ag14, communément appelée Sp2/0, est une lignée cellulaire de myélome murin largement utilisée pour la production d’anticorps monoclonaux. Issue de la souche de souris BALB/c, cette lignée cellulaire a été développée par fusion de cellules de la rate provenant de souris immunisées avec des cellules de myélome dépourvues de l’enzyme hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (HGPRT). Cette déficience rend les cellules Sp2/0 incapables de survivre dans un milieu HAT (hypoxanthine, aminoptérine, thymidine), une caractéristique cruciale pour la sélection des hybridomes lorsqu’elles sont fusionnées avec des cellules spléniques provenant de souris immunisées, car seules les cellules d’hybridomes peuvent proliférer dans ce milieu sélectif.

La lignée cellulaire Sp2/0-Ag14 se caractérise par sa stabilité et sa robustesse en culture cellulaire, ce qui en fait un hôte de choix pour la production d’hybridomes. L’absence de production d’immunoglobulines dans ces cellules est une caractéristique essentielle, car elle empêche la sécrétion d’immunoglobulines endogènes qui pourraient interférer avec l’anticorps monoclonal produit par les hybridomes. Cette lignée cellulaire a été largement utilisée dans la recherche scientifique et les applications industrielles pour générer des anticorps monoclonaux dirigés contre un large éventail d’antigènes. Les anticorps produits sont utilisés dans la recherche, le diagnostic et les applications thérapeutiques, ce qui souligne l’utilité considérable de la lignée cellulaire Sp2/0 dans les industries biotechnologiques et pharmaceutiques.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.