Pāriet uz saturu
Sp2/0-Ag14
Audums
Asinis
Slimība
B šūnu hibridoma
Sinonīmi
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumenti

Sp2/0-Ag14

Cell line · Preces numurs 400481

Šūnu līnija Sp2/0-Ag14, ko parasti dēvē par Sp2/0, ir peles mielomas šūnu līnija, ko plaši izmanto monoklonālo antivielu ražošanā. Izcelsme...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Neliels krājums
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Sp2/0-Ag14 šūnu līnija, ko parasti dēvē par Sp2/0, ir peļu mielomas šūnu līnija, ko plaši izmanto monoklonālo antivielu ražošanai. Šī šūnu līnija, kas iegūta no peļu celma BALB/c, tika izveidota, sapludinot imunizētu peļu liesas šūnas ar mielomas šūnām, kurām trūkst enzīma hipoksantīna-guanīna fosforibosiltransferāzes (HGPRT). Šī nepilnība Sp2/0 šūnām neļauj izdzīvot HAT (hipoksantīns, aminopterīns, timidīns) barotnē, kas ir būtiska hibrīdomu selekcijai, ja tās tiek sapludinātas ar imunizētu peļu liesas šūnām, jo šajā selektīvajā barotnē var vairoties tikai hibrīdomu šūnas.

Sp2/0-Ag14 šūnu līnijai ir raksturīga stabilitāte un izturība šūnu kultūrā, tāpēc tā ir ieteicama hibrīdomu ražošanai. Tas, ka šajās šūnās nenotiek imūnglobulīnu ražošana, ir ļoti svarīga īpašība, jo tā novērš endogēno imūnglobulīnu sekrēciju, kas varētu traucēt monoklonālās antivielas, ko ražo hibridomas. Šī šūnu līnija ir plaši izmantota zinātniskajos pētījumos un rūpnieciskos lietojumos, lai radītu monoklonālas antivielas pret plašu antigēnu klāstu. Izgatavotās antivielas izmanto pētniecībā, diagnostikā un terapijā, tādējādi uzsverot Sp2/0 šūnu līnijas nozīmīgo lietderību biotehnoloģiju un farmācijas nozarē.

Audums
Asinis
Slimība
B šūnu hibridoma
Sinonīmi
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Apaļas šūnas

04Identifikatori

Atsauce
Sp2/0-Ag14 (Cytion kataloga numurs 400481)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2d
Vīrusi
Veikts tests uz ektromēlijas vīrusu (peļu bakas), un tas atzīts par negatīvu.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Savāc barotni ar peldošām šūnām mikrocentrifūgas mēģenē. Noskalojiet pielipušās šūnas, izmantojot PBS bez kalcija un magnija (3-5 ml PBS T25, 5-10 ml T75 šūnu kultūru kolbām). Pievienojiet Accutase (1-2 ml uz T25, 2,5 ml uz T75 šūnu kultūru kolbu), šūnu sloksnei jābūt pilnībā pārklātai. Inkubēt 10 minūtes 37 °C temperatūrā. Apvienot peldošās šūnas un atdalītās šūnas vienā mēģenē, centrifugēt ar 300xg 3 minūtes. Uzmanīgi resuspendēt šūnas svaigā barotnē un iepildīt jaunās kolbās, kurās ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
Saglabājiet šūnu blīvumu starp 5 x 104 un 5 x 106 dzīvotspējīgām šūnām/ml.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
BALB/c