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Sp2/0-Ag14
Gewebe
Blut
Krankheit
B-Zell-Hybridom
Synonyme
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

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Sp2/0-Ag14

Cell line · Artikelnummer 400481

Die Zelllinie Sp2/0-Ag14, allgemein als Sp2/0 bezeichnet, ist eine murine Myelomzelllinie, die in großem Umfang für die Herstellung monoklonaler Antikörper verwendet wird. Ursprünglich...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Sp2/0-Ag14-Zelllinie, allgemein als Sp2/0 bezeichnet, ist eine Myelom-Zelllinie der Maus, die in großem Umfang für die Herstellung monoklonaler Antikörper verwendet wird. Diese Zelllinie stammt vom BALB/c-Mausstamm ab und wurde durch Fusion von Milzzellen immunisierter Mäuse mit Myelomzellen entwickelt, denen das Enzym Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT) fehlt. Aufgrund dieses Mangels sind die Sp2/0-Zellen nicht in der Lage, in einem HAT-Medium (Hypoxanthin, Aminopterin, Thymidin) zu überleben, was für die Selektion der Hybridome entscheidend ist, wenn sie mit Milzzellen von immunisierten Mäusen fusioniert werden, da sich nur die Hybridomazellen in diesem selektiven Medium vermehren können.

Die Sp2/0-Ag14-Zelllinie zeichnet sich durch ihre Stabilität und Robustheit in der Zellkultur aus, was sie zu einem bevorzugten Wirt für die Hybridomaproduktion macht. Das Fehlen der Immunglobulinproduktion in diesen Zellen ist ein entscheidendes Merkmal, da es die Sekretion endogener Immunglobuline verhindert, die mit den von den Hybridomen produzierten monoklonalen Antikörpern interferieren könnten. Diese Zelllinie wurde in der wissenschaftlichen Forschung und bei industriellen Anwendungen zur Herstellung monoklonaler Antikörper gegen eine Vielzahl von Antigenen eingesetzt. Die produzierten Antikörper werden in der Forschung, der Diagnostik und bei therapeutischen Anwendungen eingesetzt, was den großen Nutzen der Sp2/0-Zelllinie in der biotechnologischen und pharmazeutischen Industrie unterstreicht.

Gewebe
Blut
Krankheit
B-Zell-Hybridom
Synonyme
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
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  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen

04Bezeichner

Quellenangabe
Sp2/0-Ag14 (Cytion-Katalognummer 400481)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
H-2d
Viren
Getestet und für negativ befunden auf Ektromelie-Virus (Mauspocken).

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Medium mit schwimmenden Zellen in einem Mikrozentrifugenröhrchen auffangen. Die anhaftenden Zellen mit PBS ohne Kalzium und Magnesium spülen (3-5 ml PBS für T25-, 5-10 ml für T75-Zellkulturflaschen). Accutase zugeben (1-2 ml pro T25-, 2,5 ml pro T75-Zellkulturflasche), die Zellschicht muss vollständig bedeckt sein. Bei 37 Grad Celsius 10 Minuten lang inkubieren. Die schwimmenden Zellen und die abgelösten Zellen in einem Röhrchen vereinigen und bei 300xg 3 Minuten lang zentrifugieren. Die Zellen vorsichtig in frischem Medium resuspendieren und in neue Fläschchen mit frischem Medium umfüllen.
Aussaatdichte
Halten Sie die Zelldichte zwischen 5 x 104 und 5 x 106 lebensfähigen Zellen/ml.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BALB/c