Skip to content
Sp2/0-Ag14
Tissue
เลือด
Disease
ไฮบริโดมาของเซลล์บี
Synonyms
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Documents

Sp2/0-Ag14

Cell line · Product number 400481

The Sp2/0-Ag14 cell line, commonly referred to as Sp2/0, is a murine myeloma cell line used extensively for the production of monoclonal antibodies. Origi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ Sp2/0-Ag14 หรือที่เรียกกันทั่วไปว่า Sp2/0 เป็นเซลล์ไลน์ไมอีโลมาของหนูที่ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอล มีต้นกำเนิดจากสายพันธุ์หนู BALB/c โดยเซลล์ไลน์นี้ถูกพัฒนาขึ้นจากการหลอมรวมเซลล์ม้ามของหนูที่ได้รับการกระตุ้นภูมิคุ้มกันกับเซลล์ไมอีโลมาซึ่งขาดเอนไซม์ไฮโปแซนธีน-กัวนิน ฟอสโฟไรโบซิลทรานสเฟอเรส (HGPRT)การขาดแคลนนี้ทำให้เซลล์ Sp2/0 ไม่สามารถอยู่รอดในอาหารเลี้ยงเชื้อ HAT (ไฮโปแซนทีน, อะมิโนเพอริน, ไทมิดีน) ได้ ซึ่งเป็นลักษณะสำคัญสำหรับการคัดเลือกไฮบริโดมาเมื่อรวมกับเซลล์ม้ามจากหนูที่ได้รับการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน เนื่องจากมีเพียงเซลล์ไฮบริโดมาเท่านั้นที่สามารถเพิ่มจำนวนได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่คัดเลือกนี้

สายเซลล์ Sp2/0-Ag14 มีลักษณะเด่นคือความเสถียรและความแข็งแรงในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ทำให้เป็นโฮสต์ที่ได้รับความนิยมสำหรับการผลิตไฮบริโดมา การที่เซลล์เหล่านี้ไม่มีการผลิตอิมมูโนโกลบูลินเป็นคุณลักษณะสำคัญ เนื่องจากช่วยป้องกันการหลั่งอิมมูโนโกลบูลินที่มีอยู่ภายในซึ่งอาจรบกวนการผลิตแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลที่ผลิตโดยไฮบริโดมาสายเซลล์นี้ได้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยทางวิทยาศาสตร์และการประยุกต์ใช้ในอุตสาหกรรมสำหรับการสร้างแอนติบอดีชนิดโมโนโคลนอลต่อแอนติเจนหลากหลายชนิด แอนติบอดีที่ผลิตได้ถูกนำไปใช้ในงานวิจัย การวินิจฉัย และการประยุกต์ใช้ในทางการรักษา ซึ่งแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ที่สำคัญของสายเซลล์ Sp2/0 ในอุตสาหกรรมเทคโนโลยีชีวภาพและเภสัชกรรม

Tissue
เลือด
Disease
ไฮบริโดมาของเซลล์บี
Synonyms
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เซลล์กลม

04Identifiers

Citation
Sp2/0-Ag14 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 400481)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Viruses
ทดสอบแล้วไม่พบเชื้อไวรัสเอคโตรเมเลีย (ฝีดาษหนู)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Subculturing
เก็บตัวอย่างที่มีเซลล์ลอยในหลอดไมโครเซนทริฟิวจ์ ล้างเซลล์ที่ติดผนังด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (3-5 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T25, 5-10 มล. สำหรับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75) เติม Accutase (1-2 มล. ต่อขวด T25, 2.5 มล. ต่อขวด T75) ให้ครอบคลุมแผ่นเซลล์ทั้งหมดบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที รวมเซลล์ที่ลอยและเซลล์ที่หลุดออกในหลอดเดียวกัน แล้วปั่นเหวี่ยงที่ 300xg เป็นเวลา 3 นาที ละลายเซลล์อย่างระมัดระวังในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และแบ่งใส่ลงในขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่
Seeding density
รักษาความหนาแน่นของเซลล์ให้อยู่ระหว่าง 5 x 104 ถึง 5 x 106 เซลล์ที่มีชีวิต/มิลลิลิตร
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c