Mine otse sisu juurde
Sp2/0-Ag14
Kude
Veri
Haigus
B-rakkude hübriidoom
Sünonüümid
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumendid

Sp2/0-Ag14

Cell line · Toote number 400481

Rakuliin Sp2/0-Ag14, mida tavaliselt nimetatakse Sp2/0-ks, on hiire müeloomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt monoklonaalsete antikehade tootmiseks. Päritolu...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Varud on väikesed
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Sp2/0-Ag14 rakuliin, mida tavaliselt nimetatakse Sp2/0, on hiirte müeloomi rakuliin, mida kasutatakse laialdaselt monoklonaalsete antikehade tootmiseks. See BALB/c hiirtüvest pärit rakuliin on arendatud immuniseeritud hiirte põrnarakkude ja müeloomirakkude liitmisel, millel puudub ensüüm hüpoksantiin-guaniinfosforibosüültransferaas (HGPRT). Selle puuduse tõttu ei suuda Sp2/0 rakud elada HAT (hüpoksantiin, aminopteriin, tümidiin) keskkonnas, mis on oluline omadus hübriidoomide selektsiooniks, kui need fusioonitakse immuniseeritud hiirte põrna rakkudega, sest ainult hübriidoomi rakud saavad selles selektiivses keskkonnas paljuneda.

Sp2/0-Ag14 rakuliini iseloomustab rakukultuuris stabiilsus ja vastupidavus, mistõttu on see eelistatud peremees hübridoomide tootmiseks. Immunoglobuliinide tootmise puudumine nendes rakkudes on kriitiline omadus, sest see takistab endogeensete immunoglobuliinide sekretsiooni, mis võivad segada hübriidoomade toodetud monoklonaalseid antikehi. Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud teadusuuringutes ja tööstuslikes rakendustes monoklonaalsete antikehade genereerimiseks paljude antigeenide vastu. Toodetud antikehi kasutatakse teadusuuringutes, diagnostikas ja terapeutilistes rakendustes, mis näitab Sp2/0 rakuliini märkimisväärset kasutust biotehnoloogilises ja farmaatsiatööstuses.

Kude
Veri
Haigus
B-rakkude hübriidoom
Sünonüümid
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümmargused rakud

04Tunnused

Viide
Sp2/0-Ag14 (Cytioni katalooginumber 400481)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2d
Viirused
Testitud ja leitud ektromelia viiruse (hiireviiruse) suhtes negatiivseks.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge mikrotsentrifuugitoru keskmise koos hõljuvate rakkudega. Loputage kleepunud rakud, kasutades PBS-i ilma kaltsiumi ja magneesiumita (3-5 ml PBS-i T25, 5-10 ml T75 rakukultuurikolbide puhul). Lisage Accutase (1-2 ml T25, 2,5 ml T75 rakukultuurikolbi kohta), rakukile peab olema täielikult kaetud. Inkubeerige 37 kraadi juures 10 minutit. Ühendage hõljuvad rakud ja eraldunud rakud ühes katseklaasis, tsentrifuugige 300xg juures 3 minutit. Resuspenseerige rakud ettevaatlikult värskes söötmes ja doseerige uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötme.
Külvitihedus
Säilitage rakkude tihedus vahemikus 5 x 104 kuni 5 x 106 eluvõimelist rakkud/ml.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c