Siirry sisältöön
Sp2/0-Ag14
Kudos
Veri
Sairaus
B-soluhybridooma
Synonyymit
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Asiakirjat

Sp2/0-Ag14

Cell line · Tuotenumero 400481

Sp2/0-Ag14-solulinja, jota yleisesti kutsutaan nimellä Sp2/0, on hiiren myeloomasolulinja, jota käytetään laajalti monoklonaalisten vasta-aineiden tuotantoon. Alkuperä...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa vähän
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Sp2/0-Ag14-solulinja, josta käytetään yleisesti nimitystä Sp2/0, on hiiren myeloomasolulinja, jota käytetään laajalti monoklonaalisten vasta-aineiden tuotannossa. Tämä BALB/c-hiirikannasta peräisin oleva solulinja kehitettiin fuusioimalla immunisoiduista hiiristä saatuja pernasoluja myeloomasoluihin, joista puuttuu hypoksantiini-guaniinifosforibosyylitransferaasi-entsyymi (HGPRT). Tämä puutos tekee Sp2/0-soluista kykenemättömiä selviytymään HAT-mediassa (hypoksantiini, aminopteriini, tymidiini), mikä on ratkaisevan tärkeää hybridooman valinnan kannalta, kun se fuusioidaan immunisoitujen hiirten pernasolujen kanssa, koska vain hybridoomisolut voivat lisääntyä tässä valikoivassa mediassa.

Sp2/0-Ag14-solulinjalle on ominaista sen vakaus ja kestävyys soluviljelyssä, mikä tekee siitä ensisijaisen isännän hybridoomien tuotantoon. Immunoglobuliinituotannon puuttuminen näistä soluista on kriittinen ominaisuus, koska se estää sellaisten endogeenisten immunoglobuliinien erittymisen, jotka voisivat häiritä hybridoomien tuottamaa monoklonaalista vasta-ainetta. Tätä solulinjaa on käytetty laajalti tieteellisessä tutkimuksessa ja teollisissa sovelluksissa monoklonaalisten vasta-aineiden tuottamiseen monenlaisia antigeenejä vastaan. Tuotettuja vasta-aineita käytetään tutkimuksessa, diagnostiikassa ja terapeuttisissa sovelluksissa, mikä korostaa Sp2/0-solulinjan merkittävää hyödyllisyyttä bioteknologian ja lääketeollisuuden alalla.

Kudos
Veri
Sairaus
B-soluhybridooma
Synonyymit
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Pyöreät kennot

04Tunnisteet

Lähdeviite
Sp2/0-Ag14 (Cytionin luettelonumero 400481)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2d
Virukset
Testattu ja todettu negatiiviseksi ektromelia-viruksen (hiirenrokko) osalta.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Kerää väliaine, jossa on kelluvia soluja, mikrosentrifugiputkeen. Huuhtele tarttuneet solut PBS:llä, jossa ei ole kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml PBS:ää T25-soluviljelypulloissa, 5-10 ml T75-soluviljelypulloissa). Lisää Accutase (1-2 ml T25-soluviljelypulloa kohti, 2,5 ml T75-soluviljelypulloa kohti), solulevyn on peitettävä kokonaan. Inkuboidaan 37 asteessa 10 minuuttia. Yhdistä kelluvat solut ja irronneet solut yhteen putkeen, sentrifugoi 300xg:n nopeudella 3min. Suspendoidaan solut varovasti uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja annostellaan uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
Pidä solutiheys välillä 5 x 104 ja 5 x 106 elinkykyistä solua/ml.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c