Skip to content
Sp2/0-Ag14
Tissue
Máu
Disease
Tế bào lai B
Synonyms
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Documents

Sp2/0-Ag14

Cell line · Product number 400481

The Sp2/0-Ag14 cell line, commonly referred to as Sp2/0, is a murine myeloma cell line used extensively for the production of monoclonal antibodies. Origi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Low stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào Sp2/0-Ag14, thường được gọi tắt là Sp2/0, là một dòng tế bào u tủy bạch cầu của chuột được sử dụng rộng rãi trong sản xuất kháng thể đơn dòng. Dòng tế bào này được phát triển từ chuột BALB/c bằng cách hợp nhất tế bào lách từ chuột được tiêm chủng với tế bào u tủy bạch cầu thiếu enzym hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HGPRT). Sự thiếu hụt này khiến các tế bào Sp2/0 không thể tồn tại trong môi trường HAT (hypoxanthine, aminopterin, thymidine), một đặc điểm quan trọng cho việc chọn lọc hybridoma khi được hợp nhất với các tế bào lách từ chuột được tiêm chủng, vì chỉ các tế bào hybridoma mới có thể phát triển trong môi trường chọn lọc này.

Dòng tế bào Sp2/0-Ag14 được đặc trưng bởi tính ổn định và độ bền vững trong nuôi cấy tế bào, khiến nó trở thành vật chủ ưa thích cho sản xuất hybridoma. Sự vắng mặt của sản xuất immunoglobulin trong các tế bào này là một đặc điểm quan trọng vì nó ngăn chặn sự tiết ra immunoglobulin nội sinh có thể can thiệp vào kháng thể đơn dòng được sản xuất bởi hybridoma. Dòng tế bào này đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu khoa học và ứng dụng công nghiệp để sản xuất kháng thể đơn dòng chống lại nhiều loại kháng nguyên khác nhau. Các kháng thể được sản xuất được sử dụng trong nghiên cứu, chẩn đoán và ứng dụng điều trị, nhấn mạnh tính hữu ích đáng kể của dòng tế bào Sp2/0 trong ngành công nghệ sinh học và dược phẩm.

Tissue
Máu
Disease
Tế bào lai B
Synonyms
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Classification

Organism
Mouse
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tế bào tròn

04Identifiers

Citation
Sp2/0-Ag14 (Số catalog Cytion 400481)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Expression and susceptibility

Antigen expression
H-2d
Viruses
Đã được kiểm tra và xác định là âm tính với virus ectromelia (bệnh đậu chuột).

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Subculturing
Thu thập môi trường nuôi cấy có chứa tế bào nổi trong ống ly tâm vi lượng. Rửa tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (3-5 ml PBS cho bình nuôi cấy T25, 5-10 ml cho bình nuôi cấy T75). Thêm Accutase (1-2 ml cho mỗi bình T25, 2,5 ml cho mỗi bình T75), đảm bảo lớp tế bào được phủ hoàn toàn. Ủ ở 37°C trong 10 phút. Trộn các tế bào nổi và tế bào bong ra trong một ống, ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Cẩn thận hòa tan lại các tế bào trong môi trường tươi và phân phối vào các bình nuôi cấy mới chứa môi trường tươi.
Seeding density
Giữ mật độ tế bào trong khoảng từ 5 x 10⁴ đến 5 x 10⁶ tế bào sống/ml.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c