Przejdź do treści
Sp2/0-Ag14
Chusteczka
Krew
Choroba
Hybrydoma komórek B
Synonimy
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Dokumenty

Sp2/0-Ag14

Cell line · Numer produktu 400481

Linia komórkowa Sp2/0-Ag14, powszechnie nazywana Sp2/0, to mysia linia komórkowa szpiczaka, szeroko wykorzystywana do produkcji przeciwciał monoklonalnych. Pochodzenie...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
Niski stan magazynowy
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa Sp2/0-Ag14, powszechnie określana jako Sp2/0, jest linią komórek szpiczaka mysiego szeroko stosowaną do produkcji przeciwciał monoklonalnych. Pochodząca ze szczepu myszy BALB/c, ta linia komórkowa została opracowana przez połączenie komórek śledziony od immunizowanych myszy z komórkami szpiczaka, które nie posiadają enzymu fosforybozylotransferazy hipoksantynowo-guaninowej (HGPRT). Niedobór ten sprawia, że komórki Sp2/0 nie są w stanie przetrwać w pożywce HAT (hipoksantyna, aminopteryna, tymidyna), co ma kluczowe znaczenie dla selekcji hybrydoma po połączeniu z komórkami śledziony od immunizowanych myszy, ponieważ tylko komórki hybrydoma mogą namnażać się w tej selektywnej pożywce.

Linia komórkowa Sp2/0-Ag14 charakteryzuje się stabilnością i wytrzymałością w hodowli komórkowej, co czyni ją preferowanym gospodarzem do produkcji hybrydomy. Brak produkcji immunoglobulin w tych komórkach jest krytyczną cechą, ponieważ zapobiega wydzielaniu endogennych immunoglobulin, które mogłyby kolidować z przeciwciałami monoklonalnymi wytwarzanymi przez hybrydomy. Ta linia komórkowa była szeroko wykorzystywana w badaniach naukowych i zastosowaniach przemysłowych do generowania przeciwciał monoklonalnych przeciwko szerokiej gamie antygenów. Wytworzone przeciwciała są wykorzystywane w badaniach, diagnostyce i zastosowaniach terapeutycznych, podkreślając znaczącą użyteczność linii komórkowej Sp2/0 w przemyśle biotechnologicznym i farmaceutycznym.

Chusteczka
Krew
Choroba
Hybrydoma komórek B
Synonimy
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki

04Identyfikatory

Źródło
Sp2/0-Ag14 (numer katalogowy Cytion 400481)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
H-2d
Wirusy
Wynik testu na obecność wirusa ektromelii (mysiej ospy) był ujemny.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać pożywkę z pływającymi komórkami do probówki mikrowirówki. Przepłukać przylegające komórki używając PBS bez wapnia i magnezu (3-5 ml PBS na kolbę T25, 5-10 ml na kolbę T75). Dodaj Accutase (1-2 ml na kolbę T25, 2,5 ml na kolbę T75), arkusz komórek musi być całkowicie przykryty. Inkubować w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 10 minut. Połączyć pływające komórki i oderwane komórki w jednej probówce, odwirować przy 300xg przez 3 minuty. Ostrożnie ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
Utrzymuj gęstość komórek między 5 x 104 a 5 x 106 żywych komórek/ml.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
BALB/c