Ga naar de inhoud
Sp2/0-Ag14
Weefsel
Bloed
Ziekte
B-cel hybrideoom
Synoniemen
SP2/0-Ag14, SP2/0-AG14, SP2/0-ag14, Sp2/O-Ag14, SP2/O-Ag14, Sp2/0-Ag-14, SP2-0-Ag14, SP2/0 Ag-14, SP-2/0-AG14, Sp 2/0-Ag 14, Sp2/0, SP2/0, Sp2/O, SP2/O, SP-2, SP2, GM03569, GM3569, GM03569B, GM3569B, GM03569D

Documenten

Sp2/0-Ag14

Cell line · Productnummer 400481

De Sp2/0-Ag14-cellijn, gewoonlijk aangeduid als Sp2/0, is een myeloomcellijn van de muis die op grote schaal wordt gebruikt voor de productie van monoklonale antilichamen. Oorsprong...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Weinig op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De Sp2/0-Ag14 cellijn, meestal Sp2/0 genoemd, is een muriene myeloom cellijn die veel gebruikt wordt voor de productie van monoklonale antilichamen. Deze cellijn is afkomstig van de BALB/c muizenstam en is ontwikkeld door miltcellen van geïmmuniseerde muizen te fuseren met myelomacellen waarin het enzym hypoxanthine-guanine fosforibosyltransferase (HGPRT) ontbreekt. Dit gebrek zorgt ervoor dat Sp2/0-cellen niet kunnen overleven in HAT-medium (hypoxanthine, aminopterine, thymidine), een eigenschap die cruciaal is voor hybridoma-selectie wanneer deze worden gefuseerd met miltcellen van geïmmuniseerde muizen, omdat alleen de hybridoma-cellen kunnen prolifereren in dit selectieve medium.

De Sp2/0-Ag14 cellijn wordt gekenmerkt door zijn stabiliteit en robuustheid in celkweek, waardoor het een geprefereerde gastheer is voor de productie van hybridomen. De afwezigheid van immunoglobulineproductie in deze cellen is een kritische eigenschap omdat het de afscheiding voorkomt van endogene immunoglobulinen die zouden kunnen interfereren met het monoklonale antilichaam dat door de hybridomen wordt geproduceerd. Deze cellijn is uitgebreid gebruikt in wetenschappelijk onderzoek en industriële toepassingen voor het genereren van monoklonale antilichamen tegen een breed scala aan antigenen. De geproduceerde antilichamen worden gebruikt in onderzoek, diagnostiek en therapeutische toepassingen, wat de significante bruikbaarheid van de Sp2/0 cellijn in de biotechnologische en farmaceutische industrie benadrukt.

Weefsel
Bloed
Ziekte
B-cel hybrideoom
Synoniemen
  • SP2/0-Ag14
  • SP2/0-AG14
  • SP2/0-ag14
  • Sp2/O-Ag14
  • SP2/O-Ag14
  • Sp2/0-Ag-14
  • SP2-0-Ag14
  • SP2/0 Ag-14
  • SP-2/0-AG14
  • Sp 2/0-Ag 14
  • Sp2/0
  • SP2/0
  • Sp2/O
  • SP2/O
  • SP-2
  • SP2
  • GM03569
  • GM3569
  • GM03569B
  • GM3569B
  • GM03569D

02Classificatie

Organisme
Muis
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Ronde cellen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Sp2/0-Ag14 (Cytion catalogusnummer 400481)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_2199

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
H-2d
Virussen
Getest en negatief bevonden op ectromeliavirus (muizenpokken).

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Verzamel medium met drijvende cellen in een microcentrifugebuis. Spoel de aanhangende cellen met PBS zonder calcium en magnesium (3-5 ml PBS voor T25, 5-10ml voor T75 celkweekflessen). Voeg Accutase toe (1-2ml per T25, 2,5ml per T75 celkweekfles), het celblad moet volledig bedekt zijn. Incubeer gedurende 10 minuten bij 37 graden Celsius. Combineer de drijvende cellen en de losgemaakte cellen in één buis, centrifugeer bij 300xg gedurende 3 minuten. Resuspendeer de cellen voorzichtig in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven met vers medium.
Zaaidichtheid
Houd de celdichtheid tussen 5 x 104 en 5 x 106 levensvatbare cellen/ml.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c